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Tecnologie per visualizzare componenti cellulari - Coggle Diagram

- - - - le proteine sono gli effettori molecolari, svolgono molte attività, la quale con la sua struttura primari, ha insito il processo di conformazione (struttura terziaria), la proteina deve raggiungere il luogo giusto al momento giusto, ci sono proteine che lavorano singolarmente o in dimeri, o proteine che lavorano in cluster,
    - - differenza tra questa la sorgente luminosa, nell'elettronica si utilizzano gli elettroni, mentre in ottoica la luce, quest'ultima non è invasiva, in condizioni fisiologiche non si danneggia la cellula,
      - la luce fluorescente aiuta a studiare dinamiche, strutture e interazioni cellulari e molecolari, La fluorescenza è un fenomeno chimico fisico di interazione luce-materia, luce incidente colpisce la materia, (in caso di riflessione totale, fa passare) può avvenire la trasmissione, lo scattering e la fotoluminescenza. Colpendo con una luce misuriamo con lo spettrofotometro la quantità di luce assorbita e quella trasmessa
        
        la fluorescenza si genera grazie alla luce che incide sulla materia vivente che a sua volta emette un'altra luce che possiamo osservare, quando le molecole vengono colpite da luce, le molecole (alcune hanno capacità in cui gli elettroni si eccitano e vanno dallo stato base salgono allo stato eccitato, dal quale riscendo e nella discesa emettono luce fluorescente, altre emettono sempre luce visibile che però è definita fluorescenza) hanno la proprietà di emettere fluorescenza, hanno in comune gli anelli aromatici, strutture chimiche in grado di assorbire energia, quando eccitiamo i fluorofori utilizziamo una luce più adatta (sembra bianca ma è fatta da tante componenti che aiutano l'eccitazione, ognuno ha un proprio spettro di assorbimento e di emissione, in realtà quando quel fluoroforo viene colpito ha una lunghezza d'onda dove il 100% delle molecole viene eccitato, ognuno con differenti picchi)
        
        l'energia di eccitazione è più alto di quello di emissione, lo spettro di emissione deve essere sempre slittato tra la curva di assorbimento della molecola (gaussiana) e quello di emissione, tra i due picchi vi è uno slittamento, che quando si ritorna dallo stato eccitato a quello base si perde un po' di energia, spettro di emissione con energia minore
        
        la microscopia fluorescente, ci permette di analizzare molte strutture, dinamiche e localizzare. Quantizzare, è un dato quantitativo
        
        ci sono dei limiti, il potere di risoluzione massimo è di 200nm
        
        differenti tecniche aiutano a rispondere a domande in base a specifici interessi
        
        tecniche di imaging
        
        single-cell analysis
        
        single-molecule analysis
        
        studiare le malattie a livello molecolare
        
        4 elementi chiave, l'occhio (detector), il fluoroforo, la luce e il filtro (lenti particolari attraverso le quali passa la sorgente luminosa per scomporla nelle sue componenti), le piante hanno cellule flurorofore perché ricche di pigmenti
        
        per riconoscere la struttura di interesse possiamo utilizzare un anticorpo combinato con un fluoroforo, contro quella proteina in modo da poter guardare la proteina e l'organello di cui fa parte, l'immunofluorescenz può essere diretta o indiretta, quest'ultima l'anticorpo secondario presenta il fluoroforo, ma il primo anticorpo si lega all'antigene, con ciò il segnale si amplifica
        
        le proteine sono antigeniche,
        
        i lipidi, sono visualizzatili anche essi con anticorpi, la Filippina riconosce il colesterolo colorandolo di blu
        
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