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Intro BBC - Coggle Diagram
Intro BBC
microscope
électrique
tissu mort
limite résolut°
1 nm
types
à transmiss°
faisceaux électrons passe à travers échantillon
plat + int C
limite résolut°
1 nm
à balayage
analyse surface obj en faisant moulage puis bombardemt avc électrons renvoyés de manière différente
en relief
limite résolut°
10 nm
optique
tissu vivant ou mort
limite résolut°
0,2 µm
détect° prot par immunomarquage
limite résolut°
distance séparant 2 obj à lq on peut voir 2 obj
dépend longueur d'onde de ce que l'on utilise
marquage avc or colloïdal couplé avc Ac
détect° prot par immunomarquage
utilisé un Ac pr voir où se situe Ag
excité fluorophore avc lg onde précise émettant fluorescence
immunochimie
m^principe ms avc enz catalysant réact° colorée
microscope optique
marquage avc or colloïdal couplé avc Ac
microscope électrique
varier taille billes or pr identifier prot intérêt
colocalisat°
tuer C pr perméabiliser membrane afin qu'Ac passe
détect° prot ds C vivantes avc GFP
couplage prot avc GFP
GFP
Green Fluorescent Protein
différentes variantes fluorescent ds différentes lg ondes
interactions moléculaires par transfert
d‘énergie entre molécules fluorescentes (FRET)
qd actine CFP et YFP loins
lg onde 433 nm
excitat° CFP = lum bleue
qd actine CFP et YFP proches (1-10 nm : polymérisat° pr former filamt)
lg onde 433 active CFP
lum bleu à 475 nm
active YFP
lum jaune à 527 nm
permet renseigner distance entre mol actine
étudier 1 C sans microscope = séparat° compartimts Cr par centrifugat°
purifiicat° fract° par centrifugat° en gradient de densité