1- Piruvato generado en la glucólisis pasa del citosol a la matriz de la mitocondria, en la que sufre una descarboxilación oxidativa y se transforma en Acetil-CoA. En este proceso se libera CO2 y se reduce el NAD en NADH, asimismo, la reacción es catalizada por la enzima piruvato deshidrogenasa; esta enzima va a necesitar 5 cofactores para llevar a cabo esta conversión: Tiamina (vitamina B1), FAD (vitamina B2), NAD (vitamina B3), Ácido pantoténico (vitamina B5) y Ácido lipódico. Este proceso es irreversible.