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Engenharia genética, Utiliza - Coggle Diagram
Engenharia genética
Terapia gênica
Pode ser
Ex vivo
In vivo
Atua
na causa fundamental da doença genética
Exemplo
Terapia gênica em câncer
Aplica-se em
Produção de proteínas recombinantes
produzir para
Imunização e produção de anticorpos
Entender estrutura e função de proteínas
Medicamento biológicos
3 etapas
inserção do gene
sistemas eucariotos
utiliza
gene repórter
sistema procarioto
indução da expressão
processo controlado por
repressor lac
utilizando
iPTG
purificação e análise
através de
cromatrografia de afinidade e SDS-PAGE
Aplica-se em
Vacina de DNA
Utiliza
Enzimas modificadoras de DNA
Fosfatase
Polimerase
Fragmento klenow
Nuclease
Endonuclerase
Exonuclease
Ligase
Necessita
Quinase
Aplica-se em
Vacina de RNA
Exemplo
Vacina de COVID-19 Pfizer/Biontech
Aplica-se em
Transgênicos
Exemplo
Planta de algodão resistente a largatas
Vacas produtoras de leite sem lactose
Aplica-se em
Terapia celular e engenharia tecidual
Exemplo
CAR-T Cell
inserção
Gene quimérico
4 domínio: ScFV, Hinge, Transmembrânico, Intracelular
Plasmídeo recombinante
objetivo
Receptor quimérico reconhecer células tumorais
iPSC
reprogramação de
células somáticas
a partir de
fatores de transcrição especifícos
para retornarem ao estado de
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Bioimprint
utiliza
impressoras 3D, biopolímeros e células
para produzir
estruturas volumétricas que mimetizam órgão e tecidos
Organóides
é feito
pequenas culturas de tecidos tridimencionais
para replicar
a complexidade de um órgão para estudo
Aplica-se em
Clonagem gênica
Isolamento e digestão do DNA
Ligação dos fragmentos de DNA ao vetor
Utiliza
Transferência da molécula recombinante para a célula alvo
Seleção dos clones recombinantes
Escolha do vetor apropriado
Composto por
Região promotora
Origem de replicação
Sítio múltiplo de clonagem
Gene de resistência a antibióticos
Ligação dos fragmentos no vetor
Aptâmeros
são
oligonucleotídeos de fita simples
em relação aos anticorpos apresenta
Vantagens
Menores
Maior afinidade e especificidade
Baixo custo
Menor variação entre lotes
Desvantagens
Rápida eliminação
Difícil ligação com proteínas hidrofóbicas e ácidas
Aplicações
Drug delivery
Novas drogas
Diagnóstico de doenças
Biomagem
selecionado através de
SELEX
Utiliza
Editores de genomas
TALEN
cada domínio proteico reconhece
1 nucleotídeo
Linker
ZFN
proteínas dedo de zinco reconhecem
3 nucleotídeos
utiliza nuclease
Fok 1
Crispr-Cas9
composto por
gRNA
contém
Sequência PAM
Proteína Cas9
Provoca
quebra na dupla fita de DNA
reparado por
Non-homologous end joinig ou Reparo na quebra de dupla fita dependente de homologia