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NMX-AA-042-SCFI-2015 ANÁLISIS DE AGUA - ENUMERACIÓN DE ORGANISMOS…

- - - - Para su traslado
        
        Mantenerse a 4 °C
      - En el laboratorio
        
        En refrigeración a 4 °C.
        Atempar antes del análisis sin exceder en todo el proceso las 24 h después de la recolección de la útlima muestra.
        
        A 2 °C puede ser analizada hasta 48 h después de su recolección.
      - Siempre que sea posible, llenar el frasco o bolsa hasta 2/3 partes de su capacidad, una cantidad menor sería insuficiente, si fuera mayor, disminuiría el espacio de aire disponible necesario para homogeneizar la muestra.
        
        DILUYENTE, MEDIOS DE CULTIVO
        
        Medios de cultivo prueba presuntiva
        
        Caldo lauril triptosa o caldo lauril sulfato de sodio
        
        Caldo MacConkey
        
        Caldo Lactosa
        
        REACTIVOS
        
        EQUIPO Y MATERIALES
        
        Horno para esterilización por calor seco con temperatura de 170 a 175 ºC durante 2 h ó 180 °C X 1 h.
        
        Autoclave que alcance y mantenga una temperatura de al menos 121 ºC o una presión manométrica de 103 kPa, X 15 min.
        
        Incubadora o baño de agua con termostato controlado de 35 °C
        
        Incubadora o baño de agua con termostato controlado de 44,5 °C
        
        Medidor de pH
        
        Frascos de vidrio o bolsas estériles para muestreo
        
        Pipetas graduadas estériles
        
        Cajas Petri
        
        Tubos de fermentación (campanas Durham)
        
        Tubos de vidrio con tapón
        
        Asas bacteriológicas
        
        Material común de laboratorio
        
        PROCEDIMIENTO
        
        Incluir de forma paralela controles positivos y negativos con cepas control.
        
        3 more items...
        
        Reactivo de Kovac o equivalente para la prueba de indol.
        
        Reactivo de oxidasa para la prueba de oxidasa
        
        Diluyente
        
        Disolución de fosfato
        
        Disolver 34 g del fosfato monobásico de potasio en 500 mL de agua destilada. Ajustar el pH entre 6,7 - 7,7 con una disolución de hidróxido de sodio (1 mol/L) y completar a 1 L con agua destilada
        
        Disolución de Cloruro de Magnesio
        
        Disolver 38 g de cloruro de magnesio anhidro u 81 g de cloruro de magnesio hexahidratado en 1 L de agua destilada.
        
        Disolución amortiguadora de fosfatos
        
        Adicionar 1,25 mL de disolución de fosfato y 5,0 mL de disolución de cloruro de magnesio y disolver en 1 L de agua destilada. Distribuir en volúmenes convenientes de acuerdo a las diluciones a realizar y esterilizar en autoclave de 120 ºC a 122 ºC o una presión manométrica de 103 kPa x 15 min. El pH final debe estar entre 6,9 y 7,1
        
        Medios de cultivo prueba confirmativa
        
        Medio para producción de indol
        
        Agua de triptona o agua peptonada
        
        Caldo lauril triptosa manitol con triptófano: medio para producción de gas y formación de indol.
        
        Medio para tubo único: formación de gas y producción de indol
        
        Caldo para producción de gas
        
        Caldo lactosa bilis verde brillante para coliformes totales y coliformes fecales
        
        Caldo EC para coliformes fecales termotolerantes
      - Para muestras que contengan cloro libre, colocar en su interior, previo a la esterilización, 0,1 mL de disolución de tiosulfato de sodio al 10 %; si son bolsas estériles comerciales, estas deben contener el tiosulfato de sodio.