Vibrio fischeri es una bacteria marina, bioluminiscente no patógena con forma bacilar, Gramm-negativa, anaerobia facultativa, halofílica, con dos flagelos en uno de los polos, que vive de forma libre en las aguas marinas o como simbionte en las estructuras productoras de luz de algunos peces y calamares entre otros.
EQUIPO Y MATERIAL
REACTIVOS Y DISOLUCIONES
RECOLECCIÓN, PRESERVACIÓN Y ALMACENAMIENTO DE MUESTRAS
Las muestras se colocan en recipientes lavados con detergente libre de fosfatos y enjuagar dos veces con agua de la llave.
Sumergir por lo menos, durante 24 h el material en una disolución de ácido nítrico aproximadamente al 10 %
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Los frascos de vidrio ambar de borosilicato de boca angosta, capacidad min. 20 mL
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Si la muestra contiene más de una tercera parte de sólidos o lodos, es necesario recolectar el doble de muestra en un mismo recipiente de mayor capacidad.
Mantenerse cerradas, en oscuridad y en frio a una temperatura de 4,0 °C ± 2,0 °C, desde su recolección, sin la adición de preservadores, hasta su análisis
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PROCEDIMIENTO
Está prohibida la reutilización del material desechable y de muestreo que haya tenido contacto con las muestras
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Reactivo biológico
Bacteria liofilizada Vibrio fischeri (NRRL B-11177). La bacteria liofilizada debe ser almacenada a una temperatura de -18,0 °C o menor a ésta
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Otros reactivos con pureza ≥ 99,5 %
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Disoluciones
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Medio de dilución. Disolución de cloruro de sodio (NaCl) al 2 % (20,0 g/L)
Medio de dilución de tres sales. Disolución preparada en agua destilada con 2 % de cloruro de sodio; 0,204 % de cloruro de magnesio hexahidratado y 0,030 % de cloruro de potasio
Medio de dilución para muestras de agua marina o salobre. El medio de dilución puede ser agua de mar o salobre artificial preparada
Disolución de ajuste osmótico. Preparada al 22 % (220,0 g/L) de cloruro de sodio con agua destilada
Cloruro de sodio (NaCl) en cristales. Puede emplearse también para ajustar al 2 % la salinidad de la concentración inicial de la muestra
Equipo
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Luminómetro
Con capacidad de medir la luminiscencia bacteriana y con control de temperatura, ajustada a 15,0 °C ± 1,0 °C
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Balanza analítica con rango de presición de 0,0001 g
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Material
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Cubrebocas, guantes de nitrilo, lentes de seguridad
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