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cultura de celulas, Soros: possuem hormônios e fatores de crescimento que…
cultura de celulas
Contaminação
Micoplasma: bactéria sem parede celular, cresce lentamente, não mata as células, mas altera seu comportamento
É a presença de algo indesejado na cultura, podendo ser outra linhagem celular ou microrganismos
A contaminação cruzada de culturas diferentes geralmente acontece diferentes linhagens são trabalhadas no mesmo fluxo sem a devida assepsia
As culturas podem se infectar pelo manuseio incorreto de equipamentos, equipamentos sujos, meios e reagentes epele do pesquisador
Indícios macroscópicos de contaminação: turbidez,
filamentos, nata, "buracos" e viradas bruscas de pH
A contaminação pela presença de microganismos pode inibir o crescimento celular, causar morte celular e levar a resultados experimentais inconsistentes
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meio de cultura
componentes
Antibióticos: por causar efeitos adversos na cultura, e induzir a resistência bacteriana, é recomendado que seja evitado sua
utilização
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Vitaminas: colina, retinóides e ácido ascórbico
Fontes de Carbono: a utilização da glicose e glutamina pelas células podem gerar lactato, o que causa acidificação do meio
Precursores de ácidos nucleicos: guanosina, citosina adenosina, uracila e timidina,
pH: toda cultura possui um pH ótimo (entre7,2 e 7,4), e o teor de gás carbônico é fundamentar para a sua manutenção
meios generalizados dificultam a identificação de quais as macromoléculas essenciais para cada celula
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misturas com os nutrientes necessários para o crescimento celular, especificas para cada tipo de linhagem
podem ser preparados, comprados ou em pó restituídos
Técnicas de assepsia
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Trabalhar sempre na cabine de fluxo laminar, limpa com álcool 70% e esterilizada com luz UV
evitar: tossir, espirar, etc
Morfologia
fibroblastos
aderentes, alongadas, bipolares
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Tipos de cultura
Cultutas primarias
retirada diretamente de tecidos, podendo ser facilmente contaminada
obtidos de tecidos, órgãos ou lavados por tratamentos mecânicos ou enzimáticos
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Culturas secundarias
São fenotipicamente diferente de suas progenitoras: em sua maioria são menores e mais redondas e possuem uma grande proporção entre núcleo e citoplasma
Por causa das mutações, acabam deixando de expressar os genes de seus tecidos específicos
Devido às suas alterações genéticas, são consideradas células imortalizadas, não tem tempo devida limite em cultura
São obtidas a partir de subculturas de culturas primárias por meio de mutações induzidas ou espontâneas
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incubadoras utilizadas para controle de temperatura, umidade e quantidade de gás carbônico na cultura
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