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Hibridación In Situ por Fluorescencia (FISH)
CARACTERÍSTICAS GENERALES
Es una técnica de laboratorio para detectar y localizar una secuencia específica de ADN en un cromosoma.
La técnica se basa en exponer los cromosomas a una pequeña secuencia de ADN llamado sonda que tiene una molécula fluorescente pegada a ella. La secuencia de la sonda se une a su secuencia correspondiente en el cromosoma.
El ADN marcado con fluorescencia encuentra su segmento correspondiente en uno de los cromosomas, donde se pega.
Al observar los cromosomas con un microscopio, un investigador puede encontrar la región donde el fragmento se ha unido al ADN debido al tinte fluorescente que llevaba.
VARIANTES
FISH en metafase
Se utiliza para detectar microdeleciones específicas, translocaciones o para identificar material extra de origen desconocido.
Tipos de sondas
Cósmidos
Sondas satélites
Sondas completas
FISH en interfase
Tiene la ventaja de que no es necesario cultivar previamente las células durante diversos días antes de poder analizar sus cromosomas. Además, permite una mayor resolución a la hora de detectar anomalías pequeñas.
FISH en hebra
Se aplica sobre hebras de ADN desproteinizadas (es decir, desprovistas de las histonas encargadas de su compactación).
FISH inverso
Es una técnica que se usa mucho para determinar la procedencia de un cromosoma marcador. Este tipo de FISH tiene la peculiaridad de ser el ADN problema el que se marca.
FISH on a chip
Esta nueva técnica conlleva a la necesidad de utilizar menor cantidad de reactivos, el empleo de un menor número tiempo de análisis.Los sistemas basados en chips microfluídicos evitan las dificultades de la muestra, ya que se trata de un método sencillo con un bajo coste y consumo de reactivos.
FISH multicolor
Es una adaptación del FISH que permite la visualización de los 23 pares de cromosomas a la vez, teñidos con diferentes sondas fluorescentes.
TIPOS DE PATOLOGÍAS QUE SON DIAGNÓSTICADAS
Anomalías numéricas
Alteraciones en cromosomas sexuales
Tales son los casos de síndrome de Klinefelter, trisomía X y monosomía X.
Edad materna avanzada, aborto de repetición de causa desconocida y/o fallo de implantación
Más de la mitad de los casos son debidos a alteraciones en los cromosomas 13, 16, 18, 21, 22, X e Y.
Factor masculino grave
Se pueden evitar las alteraciones cromosómicas surgidas en la descendencia de aquellos grupos de pacientes con calidad seminal baja y que tienen que recurrir a la técnica de microinyección intracitoplasmática del espermatozoide
Anomalías estructurales
Mayormente, como consecuencia de un fallo de meiosis durante la oogénesis o espermatogénesis, en los casos en que los padres presentan cariotipos normales. Algunas veces, algún miembro de la pareja puede ser portador de una anomalía estructural equilibrada, que podría transmitir a su descendencia.
HISTORIA
Esta técnica se utiliza en el mundo desde hace 24 años.
Asismo, ha causado revuelo por la introducción de colores en la citogenética tradicionalmente gris.
Dicha técnica fue desarrollada por un equipo biomédico a principios de la década de 1980.
Además, esta técnica permite la rápida determinación de aneuploidías, microdeleciones, duplicaciones, inversiones, así como la adjudicación de un marcador genético a un cromosoma (cartografía genética).
