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BRONQUITISINFECCIOSA EN SUDAMERICA - Coggle Diagram
BRONQUITISINFECCIOSA EN SUDAMERICA
Secuenciamiento S1
Se construyó un árbol de máxima verosimilitud
Se analizaron muestras diferentes muestras, estos tres linajes están claramente separados y no parecen estar relacionados
12 muestras entre 1972 y 2016
44 muestras entre 1975 y 2016
40 muestras entre 2006 y 2015
La similitud media entre los linajes sudamericanos es inferior al 80%
La codificación de S1 se amplifico con la superposición de dos fragmentos de PCR, usando primers.
Virus neutralización
El ensayo de neutralización del virus se hizo con dos
aislamientos de campo.
Se realizó con dos aislamientos de campo, UY/11/CA/18 y UY/09/CA/ 01
Estas cepas se secuenciaron completamente y se agruparon como GI-11 (UY/11/CA/18)
y linajes GI-16 (UY/09/CA/01).
Los anticueros monoespecíficos contra los
aislados se produjeron siguiendo un protocolo de inmunización estándar.
Los aislamientos se caracterizaron
serológicamente por medio de ensayos de VN beta recíprocos
Análisis filogenético
Los productos del PCR se purificaron con QIAquick purification kit y se secuencio bidireccionalmente.
Todas las muestras fueron sometidas
a GenBank
Se construye una base de datos S1 de longitud completa con el prototipo de cepas de IBV de América del Sur
Las secuencias se alinearon usando el algoritmo de MAFFT.
Neutralización cruzada
El ensayo de neutralización del virus se hizo con dos
aislamientos de campo .
Estas cepas fueron secuenciadas y agrupadas.
Los dos virus fueron aislados, amplificados y titulados en
pollitos SPF.
6 pollos SPF de 3 semanas fueron inoculados
intratraqueal mente.
Después de 2 semanas, recibieron una dosis
intravenosa.
Se evaluaron los embriones de pollo para mortalidad no
especifica, los sueros no habían neutralizado el virus.
Dos semanas después, se recolecto sangre y suero.
Comentario
La prueba de neutralización cruzada del virus que se realiza en este trabajo revela que tiene un nivel muy bajo antigénico.