Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Amplifikasi DNA dengan PCR - Coggle Diagram
Amplifikasi DNA dengan PCR
MORE
Pada pencampuran komponen PCR tahap yang paling menentukan adalah teknik pemipetan. Teknik pemipetan harus dilakukan dengan teliti dan hati-hati, terutama pada pemipetan volume kecil. Jika volume tidak sesuai maka konsentrasi akan berubah.
Pada proses pemipetan volume kecil saat proses pengeluaran microtip harus menyentuh dinding tabung.
Proses vortex bertujuan agar cairan atau larutan supaya homogen.
ALAT
Alat Vortex
Tempat pembuangan tip (bisa menggunakan bekerja glass)
Tabung/tube sampel PCR mix
Microtip ( mengikuti micropipet)
Micropipet : (10-100µ dan 1-10µ)
BAHAN
Primer forward
Primer mix
Primer reverse
DNA template
Nuclease-free water
:
ATTANTION
Posisi tangan dan badan harus tegak lurus saat memegang micropipet
Tidak boleh adanya udara pada microtip
buang microtip Yang sudah digunakan
Menyesuaikan volume micropipet dalam pemipetan
CARA KERJA
Melakukan skill thawing pada PCR mix
Ambil micropipet dan atur volumenya yang diperlukan
Buka tutup box microtip dan pasang microtip pada micropiepet (tidak boleh menggunakan tangan)
Buka tabung PCR mix lalu pipet menggunakan micropipet, setelah selesai pemipetan tutup kembali tutup tabung PCR mix dan buang microtip yang sudah dipakai
Selanjutnya memipet primer forward dengan micropipet yang sudah ada microtipnya, masukan kedalam tabung yang berisi PCR mix tadi
Selanjutnya memipet primer reverse dan masukan kedalam tabung
Kemudian pipet DNA templat dengan micropipet yang sudah diatur volumenya, masukan kedalam tabung
Selanjutnya adalah memipet nuclease-free water dengan micropipet, masukan kedalam tabung
Langkah terakhir yaitu memvorteks tabung yang sudah berisi PCR mix, primer forward-reverse, DNA template dan nuclease-free water selama 3 detik sebanyak 3 kali
https://www.youtube.com/watch?v=fEFKp4VvevY
Perhitungan
