Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
ISOLASI DNA, BUKTI SS, SUMBER, Analisis Kualitas DNA Screen Shot 2022-06…
ISOLASI DNA
-
PRINSIP
-
:star: Lisis Sel
Proses pemecahan sel terbuka dan pengeluaran membran lipid
~ Mekanis = dengan blender / mortir
~ Kimiawi = dengan SDS / CTAB
~ Enzimatis = dengan proteinase K
-
-
-
SILICA GEL BASED
McCormick (1989) 
Berdasarkan interaksi kimia antara silica bermuatan (+) dengan DNA bermuatan (-) yang berikatan melalui proses sentrifugasi
-
-
-
-
-
DNA
adalah pusat sistem penyimpanan informasi genetik pada makhluk hidup
ISOLASI DNA
adalah proses pengambilan keseluruhan DNA dari sel suatu organisme melalui berbagai metode (fisik, biologis, kimiawi)
SEJARAH DNA
James Watson & Francis Crick (1953)
Penemu struktur double helix DNA yang menjadi kunci perkembangan teknik rekayasa genetika, kultur sel, manipulasi gen, hewan transgenik, dll
-
-
LANGKAH KERJA
Sampel disimpan pada suhu - 80°C ; digerus dengan CTAB & Liquid Nitrogen dalam mortir & stamper dingin ; ditimbang sebanyak 100 mg sebagai sampel basah
-
-
Ditambahkan 400 µL PL1 ; divortex selama 10 detik ; diinkubasi pada suhu 65°C selama 30 menit sambil divortex setiap 10 menit ; disentrifugasi pada 13.000 g selama 5 menit pada suhu 4°C
-
-
Disentrifugasi pada 11.000 g selama 5 menit pada suhu 4°C ; diulang apabila masih terdapat Supernatan yang tersisa
-
-
-
Diambil 680-700 µL ke dalam kolom Nucleospin Hijau ; disentrifugasi pada 11.000 g selama 1 menit ; dibuang Supernatan nya
-
-
-
-
-
Ditambahkan 25 µL PE yang telah dihangatkan pada suhu 65°C ; diinkubasi pada suhu 65°C selama 5 menit ; disentrifugasi pada 11.000 g selama 1 menit ; diulang sebanyak 2x
-
-
-
-
-
Analisis Kualitas DNA
A260/A280 = 1,8 - 2,0 (tergolong murni)
-
-
-
-
-
By F8 :
Lutfito Aswedy Syah_110121140
Jesslyn Angelic Sukarso_110121148
Maulidha Alsafira_110121152
Nadia Kasyalifa Attamimi_110121302
-
-
-