Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Kappale 7: Eliöiden geenejä siirretään, muokataan ja poistetaan - Coggle…
Kappale 7: Eliöiden geenejä siirretään, muokataan ja poistetaan
Muuntogeenisten eliöiden perimää on muokattu
Siirtogeeninen eliö
Eliö on siirtogeeninen, kun siihen on lisätty jokin uusi geeni
Tuotetaan esim. kymosiiniä, insuliinia, interferonia
Poistogeeninen eliö
Jokin eliön oma geeni tehdään täysin toimintakyvyttömäksi
Syinä geenien toiminnan ja ilmenemisen tutkiminen, uuden ominaisuuden lisääminen
Geenejä siirretään bakteereihin plasmidien avulla
Siirtogeenisiä bakteereja tehdään yleensä proteiinin tuottamista tai geenien monistamista varten
Vieraan geenin siirtäjinä eli vektoreina käytetään plasmideja tai bakteriofageja
Yhdistelmä-DNA-tekniikka
Siirrettävä DNA: tumallisen geeneistä vastin-DNA (intronit pois)
Antibioottiresistenssigeeni
Katkaisu- ja liittäjäentsyymit
Sopiva säätelyalue
Geenejä voidaan myös säilyttää bakteerisoluissa -> geenikirjastot
Eläinten geenejä siirretään hiivasoluun plasmideilla ja keinotekoisilla kromosomeilla
Hiivassa tuotetaan mm. ihmisen insuliinia ja kasvuhormonia
Hiivasoluissa on plasmideja, jotka muistuttavat bakteerien plasmideja
Keinotekoinen kromosomi liittyy osaksi hiivan genomia ja jakautuu muiden kromosomien tapaan hiivasolun mitoosissa
Geenin siirto eläinsoluun voidaan tehdä monella tavalla
Kaikki eläinsolujen geenit eivät toimi hiivasolussa -> siirto tehdään eläinsoluun, esim. munasoluun tai soluviljelmään
Geeni siirretään munasoluun mikroinjektiolla
Siirretään useita kopioita siirrettävää geeniä mikroskoopin avulla erittäin ohuen lasiputken kautta eläimen munasoluun, jossa siittiön ja munasolun esitumat eivät vielä ole yhtyneet
Sähköpulssia ja liposomeja käytetään siirrettäessä geenejä soluviljelmiin
Soluviljelmässä olevien solujen solukalvo tehdään läpäiseväksi lyhyellä sähköpulssilla, joka annetaan solujen kasvatusliuokseen
Liposomi (fosfolipidikalvon muodostama pieni kalvorakkula), jonka sisällä on siirrettävää DNA:ta, sulautuu eläinsolun solukalvoon
Virukset ovat erinomaisia geenien kuljettajia soluviljelmissä ja eläimissä
Isäntäeliölle tyypilliset virukset ovat erittäin käyttökelpoisia vektoreita, koska ne pystyvät luonnostaan tunkeutumaan isännän soluihin ja liittämään oman perimänsä niiden perimän osaksi
Geeninsiirron onnistuminen tarkistetaan merkkigeenin tai koettimen avulla
Siirrettävän geenin yhteyteen liitetään usein ns. merkkigeeni, jonka avulla on helppo havaita geeninsiirron onnistuminen
Geenin ilmentyminen voidaan päätellä myös siitä, että solussa syntyy lähetti-RNA:ta
Poistogeenitekniikalla tutkitaan geenien toimintaa eläimissä
Poistogeeninen eläin saadaan aikaan tekemällä jokin sen geeneistä toimintakyvyttömäksi
Poistogeenisiä eläimiä on tehty pitkään alkion kantasolujen avulla
Geeni tehdään toimintakyvyttömäksi siten, että alkion kantasoluista tehtyyn kantasoluviljelmään laitetaan käsiteltävää geeniä muistuttavia keinotekoisia geenejä, jotka eivät ilmene normaalisti -> ne korvaavat viljelmän soluissa olevat vastaavat toimivat geenit -> näin syntyneitä poistogeenisiä alkion kantasoluja ruiskutetaan normaaleihin alkioihin, joissa on tämän jälkeen sekä normaaleja että poistogeenisiä soluja
Työläs ja hidas menetelmä
Crispr-tekniikka on nopeuttanut poistogeenisten eliöiden tuottamista
Voidaan kohdennetusti poistaa jokin geeni toiminnasta
Poistogeenisiä eläimiä käytetään perustutkimuksissa ja monissa sovelluksissa