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ANTICUERPOS ANTI-U1 RNP, image, image, image - Coggle Diagram
ANTICUERPOS ANTI-U1 RNP
Fase preanalítica
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Material para la muestra
Jeringas descartables de 10 mL o tubos al vacío de 10 mL, con o sin anticoagulante.
Agujas N. 20, N.21 ó N. 22.
Tubos estériles 100 x 13, con tapa de caucho o tapa rosca.
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Fase analítica
Método: ELISA
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Los micropocillos son recubiertos con antígenos purificados Sm, RNP, SS-A (Ro) o SS-B (La), Scl-70 y Jo-1 y a continuación se realiza una fase de bloqueo para reducir los vínculos no específicos durante el ensayo.
Se incuban en los pozos recubiertos con el antígeno controles, el calibrador y el suero del paciente para que los anticuerpos específicos puedan presentarse en el suero para unirse al antígeno ENA.
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Se detectan los anticuerpos unidos añadiendo a los micropocillos una enzima etiquetada conjugado anti-humano IgG.
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A continuación, se añade a los pocillos substrato de enzima específica (TMB) y se detecta la presencia de anticuerpos gracias a un cambio de color producido por la conversión del sustrato de TMB en un producto de reacción de color.
Se detiene la reacción y la intensidad del cambio de color, que es proporcional a la concentración de anticuerpos, es leída por un espectrofotómetro a 250 nm.
Los resultados son expresados en unidades de ELISA por milímetro (EU/ml) y consignados como positivos o negativos.
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