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ANTICUERPO ANTI-RO Y ANTI-LA, image, image, image - Coggle Diagram
ANTICUERPO ANTI-RO Y ANTI-LA
Fase preanalítica
Pedido:
Anticuerpos anti-Ro/La
Condiciones e indicaciones del paciente:
El paciente no requiere preparación previa para realizar el procedimiento
Que muestra se requiere:
La prueba generalmente se la hace con sangre
Materiales para la muestra:
La muestra que se recolecta debe ser de 10 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo
Transporte de la muestra
La muestra debe transportarse al laboratorio tan pronto como sea posible posterior a la recolección. Cualquier retraso puede ocasionar un rechazo a la muestra.
Después de la extracción las muestras se deben transportar a temperatura ambiente, en contenedores cerrados o gradillas y bajo las medidas de seguridad biológica. El transportista debe ser personal de salud.
Posibles interferencias, como medicamentos
: No existe interferencia alguna con la muestra
Fase analítica
Procesamiento de las muestras:
Se diluye 990 ul de buffer con 10 ul de muestra (1:100). Se homogeniza los tubos en el vortex por aproximadamente 5 segundos.
Se coloca 30 ul de suero diluido inmediatamente, asegurándose que coincida la ranura de la placa; se incuba durante 30 minutos. Se lava con el buffer, enjuagando la lámina previamente y luego dejándola por 5 minutos en el frasco Coplin.
Se coloca inmediatamente la impronta correspondiente asegurándose que coincida la ranura de la placa. Se incuba durante 40 minutos, protegiendo de la exposición a la luz.
Luego se lava usando el buffer, enjuagando la lámina previamente, dejándola por 5 minutos en el frasco de Coplin.
Se carga 30 ul de conjugado correspondiente al kit Hep 20-10 Euroimmun AG en cada cuadrante de placa Tray.
Se agregar una gota de glicerol y se coloca la lámina cubreobjetos. Se observa al microscopio de fluorescencia con el objetivo de 40X
Método
Inmunofluorescencia indirecta:
La técnica de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI), emplea cortes de varios tejidos o la línea celular tumoral (HEp-2) de epitelioma laríngeo humano como fuente antigénica, se utiliza ampliamente para el diagnóstico de enfermedades autoinmunes de muchos laboratorios.
En la Inmunofluorescencia Indirecta (IFI), los antígenos no definidos son reconocidos por los anticuerpos en el suero del paciente y ofrecen determinados patrones que son interpretados en relación con su asociación a enfermedades
Elisa:
El método de ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) implica la interacción de estos anticuerpos presentes en la muestra de suero con un antígeno preparado previamente y la adición de un anticuerpo que se adhiere a este complejo e induce un cambio de color; el resultado es un valor de densidad óptica (una escala fotométrica) que se lee como positivo, negativo o equívoco.
Fase postanalítica
En ELISA:
Cualquier valor mayor o igual a 1: 160 es significativamente positivo (en algunos laboratorios, esto se reporta en unidades internacionales en las que 1 UI equivale a 1: 160).
El grado de positividad clínica es el siguiente:
Menor o igual a I.0 U es negativo.
1,1-2,9 U es débilmente positivo.
3,0-5,9 U es positivo.
Mayor o igual a 6,0 U es muy positivo.