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ANTICUERPOS ANTI-HISTONAS, image, image, image - Coggle Diagram
ANTICUERPOS ANTI-HISTONAS
Fase preanalítica :
Pedido:
Anticuerpos anti-histonas
Condiciones e indicaciones del paciente:
Ayuno 9 horas
Que muestra se requiere:
Suero
Material para la muestra
Jeringas descartables de 10 mL o tubos al vacío de 10 mL, con o sin anticoagulante.
Agujas N. 20, N.21 ó N. 22.
Tubos estériles 100 x 13, con tapa de caucho o tapa rosca.
Compresas y torundas.
Alcohol de 70%.
Bandas o tubos flexibles de látex (ligadura).
Centrífuga
Posibles interferencias:
suero hemolizado, suero lipémico, suero ictérico
Material por utilizarse
Portaobjetos con 12 pocillos de células de cultivo
Suero Humano reactivo para LES mediante la técnica de IFI (suero control positivo).
Suero Humano no reactivo para LES mediante la técnica de IFI (suero control negativo).
Suero de Cabra anti-lgG humano conjugado con fluoresceína Fragmento F(AB')2 molécula completa.
PBS: Solución amortiguadora de fosfatos, pH 7,2 a 7,4.
Solución de contraste: Solución de Azul de Evans 100X.
Medio de montaje: glicerina al 90% en PBS (9 partes de glicerol + 1 parte de PBS).
Laminillas cubreobjetos de 60 x 22 mm.
Fase analítica
Procesamiento de las muestras
Colocar el tubo con la muestra de sangre debidamente rotulada en la centrífuga, y equilibrar la misma con igual peso.
Centrifugar durante 5 minutos a una velocidad entre 1 500 r.p.m. a 2 500 r.p.m.
Trasvasar los sueros a tubos plásticos estériles con tapa rosca utilizando una pipeta Pasteur, micropipetas o pipetas serológicas descartables.
Rotular los tubos
Método:
Inmunofluorescencia indirecta
La técnica se basa en el reconocimiento de los anticuerpos que reconocen estructuras antigénicas celulares nativas.
La interacción se evidencia por medio de un anticuerpo antiinmunoglobulina humana, producido en conejo, cabra o cobayo, dirigido contra las fracciones constantes (Fc) de las inmunoglobulinas IgG, IgA y/o IgM.
Este anticuerpo antiinmunoglobulina humano está conjugado o acoplado a un fluoróforo (generalmente isotiocianato de fluoresceína [FITC]).
Los resultados del reconocimiento de los antígenos por los autoanticuerpos presentes en el suero, plasma o cualquier otro líquido, se evalúan en un microscopio de epifluorescencia
Fase postanalítica
Cualitativo:
Positivo o Negativo
LUPUS INDUCIDO POR DROGAS
95-100%
PROCAINAMIDA
95-100%
QUINIDINA
95-100%
CLORPROMACINA
95-100%
HIDRALAZINA
95-100%
LES
18-81%
ESCLEROSIS SISTEMA
18-47%
ARTRITIS REUMATOIDEA
15-30%
SINDROME DE FELTY
60-80%
ARTRITIS CRÓNICA JUVENIL
15-40%