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Instrumentación - Coggle Diagram
Instrumentación
Es necesario bombear presiones de varios cientos de atmósferas para alcanzar velocidades de flujo razonables para los empacamientos con partículas que están en el intervalo de 3 a 10 mm.
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Sistemas de bombeo
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Bombas de tipo émbolo
Las ventajas de las bombas de émbolo incluyen su pequeño volumen interno (de 35 a 400 mL), su alta presión de salida (de hasta 10,000 psi), su facilidad para adaptarlas a la elución en gradiente y sus velocidades de flujo contantes, las cuales son en gran medida independientes de la contrapresión de la columna y la viscosidad del disolvente.
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Columnas para HPLC
Columnas analíticas
tienen una longitud de entre 5 y 25 cm, y tienen diámetros internos de 3 a 5 mm. Siempre se utilizan columnas rectas. El tamaño de partícula más común para los empacamientos es de 3 a 5 mm.
Precolumnas
Se utiliza una columna “de desperdicios” entre el contenedor de la fase móvil y el inyector para acondicionar la fase móvil.
Una columna de protección es una columna corta empacada con una fase estacionaria similar a la de la columna analítica. El propósito de la columna de protección es prevenir que impurezas como los compuestos altamente retenidos y la materia particulada alcancen y contaminen a la columna analítica.
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Empacamientos de columna
Las partículas peliculares originales eran perlas de vidrio o de polímero esféricas, no porosas, con diámetros de entre 30 y 40 mm.
Partículas porosas para cromatografía líquida consiste en micropartí- culas porosas que tienen diámetros que van de los 3 a los 10 mm; generalmente se desea una distribución muy estrecha del tamaño de las partículas para un tamaño de partícula dado.
Detectores para HPLC
Un detector de hplc debe tener un volumen interno pequeño (volumen muerto) para minimizar el ensanchamiento de banda adicional de columna. El detector debe ser pequeño y compatible con el flujo de líquido.
Los detectores más utilizados para cromatografía líquida están basados en la absorción de radiación ultravioleta o visible
Los fotómetros generalmente utilizan las líneas de 254- y 280-nm de una fuente de mercurio debido a que muchos grupos funcionales orgánicos absorben en esta región.
Los detectores espectrofotométricos son mucho más versátiles que los fotómetros y, por lo tanto, son ampliamente utilizados en los instrumentos de alta resolución.
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