Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Gen Klonlama Nedir? Nasıl Yapılır? - Coggle Diagram
Gen Klonlama Nedir? Nasıl Yapılır?
Gen klonlamanın prensiplerini açıklayabilmeli.
Gen klonlamada kullanılabilen vektörleri ve özelliklerini tanımlayabilmeli.
Gen klonlamanın nasıl yapıldığını açıklayabilmeli
rekombinant DNA teknolojisi nedir
iki yabancı dna parçasını birleştirip bir organizmaya vermek
rDNA teknolojisi ne amaçla kullanılır
insülin sekansın ı domuz yerine bira mayasında üretilmesi bir örnek ve troit gibi hormonlarla da denenmiştir
restriksiyon enzimi nedir
Bir bakteri suşundan bir enzimin ayrıştırılmasını ve enzimin viral dna yı, özgül nükleotit dizilerinden kesmek için kullanışını tanımlar
kullanıldığı alanlar
rDNA eldesi
Dna haritasının çıkarılması
polimorfizmin belirlenmesi
Probların hazırlanması
DNA modifikasyonlarının durumlarının analizleri
Bir kaç önemli not
Bu enzimler bakteriye giren yabancı dnaları kesebildiklerinden patajonleri inaktive etmekte ve virüslerden ve yabancı dnalardan korumaktadır
kendini korumak için de restriksiyon bölgelerini metilleyerek iş yapmamasını sağlar
polidromik bölgelrde iş yapar yani alttan da üstteki kısmın aynısıdır(tersi bir şekilde) fosfodiester bağını keser ve dna parçamızı yerleştiririz DNA ligaz la birleştiri
kesim şekli
Küt uclu (blunt)
iki zincirde aynı noktadan keser
Yapışkan uçlu(sticky)
Yapışmaya hazır iki uç bırakacak şekilde keser
eğer gerekli restriksiyon enzimi yoksa ne yapılır
Vektör kulanılır
ama restriksüyon enzimiyle kesilmiş bir dna parçasıyla birleşirse girebilir
vektörün özellikleri
kendini ve taşıdığı herhangi bir parçasını bağımsız bir şekilde replike edebilmeli
kopyalanacak DNA parçasının insersisyonuna olanak taşıyan tanıma dizisi içermelidir
vektörde seçicilik sağlayan marker - belirteç genleri bulunmalıdır
vektör ve vektörün taşıdığı DNA parçsı konaktan kolaylıkla ayrıştırılabilmeli
türleri
Cloning vektör
Propogation of DNA inserts
expresion vektörü
Production of protein
Başlıca vektörler
Plasmidler
Bakteriyofajlar
Kosmidler
Bakteri yapay kromozomları
Maya yapay Kromozomları
Memeli yapay kromozomları
İnsan yapay kromozomları
Gen klonlamada kullanılan plasmid ve vektörler
uPK veya iPS
uPK kullanımı ve gelecekte kişiselleştirilmiş tıp uygulamaları
İnsanda gen transferi
Viral
Adenovirüsler(DNA)
Adenenovirüs bağlantılı virüsler(AAV)
lentivirüsler(RNA)
Retrovirüsler(RNA)
Non-Viral
Phsical
DNA Fiziksel olarak hücreye girmesini içerir verimliliği düşüktür
Mechanical
Chemical and Synthetetic
Gen terapisinin Büyük Sorunları
Short-lived
İmmune Response
Viral Vectors
Multigene Disorders
target
Virallerin dez avantajları
Virushost interaction
Toxicity
İnsertional capacity and pruduction
long term expression