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MEDOTOS DE ECOLOGIA BACTERIANA image, Conteo de esporas, Numero mas…

- - - - Métodos diversos
      - Métodos microscópicos, más cultivo de placa counts (El descuento de los series de dilución)
      - La medición de la densidad óptica (DO) con un espectrofotómetro
      - Métodos microscópicos conteo directo (cámara Petroff - Hauser) microscopía eléctrica
    - - Se inserta un portaobjetos en un vaso de tierra dejándola 2 cm por encima de la superficie
      - Agregar suficiente agua alrededor del portaobjeto y se incuba durante mas de una semana
      - Sacuda las grandes partículas del suelo y limpiar la parte inferior de la diapositiva con una toalla de papel húmeda. Deje que el portaobjetos se seque complemente.
      - Sumergir el portaobjetos en ácido acético al 40% durante 1 - 3 min. (Manipule al ácido con cuidado).
      - Lavar el ácido con agua, teniendo cuidado de no molestar a la células).
      - Lavar el exceso de de mancha y deje que se seque el portaobjetos.
      - Llenar el portaobjetos con fenólico Rosa mancha durante 5 - 10 min
      - Ver en el microscopio filamentos de hongos, actinomicetos y micro-colonias bacterianas.
      - Registrar todas las observaciones.
- - - - Los agregados de suelo se trituraron con una espátula. A cada Beaker se le añadieron 250mL de agua destilada y las suspenciones se agitaron por una hora
        
        Estas suspensiones se hicieron pasar por tamices apilados (850μm, 250μm, 106μm y 63μm). Se añadió agua del tubo para facilitar el movimiento de las esporas
        
        El material retenido en los tamices de 106μm y 63μm se colocó en tubo Falcon suspendido en el agua, se centrifugó por 3min a 2000g y se removió el sobrenadante
        
        El sedimento se resuspendió en una solucion de sacarosa al 50% y se centrifugó por 2min a 2000g
        
        E sobrenadante se hizo pasar por un papel filtro Whatman 5 y se hicieron 2 lavados con agua destilada, utilizando un sistema de filtración al vacío.
        
        Los papeles filtro se colocaron en placas de Petri y se mantuvieron en refrigeración hasta el momento del conteo.
- - - - Preparación de la muestra, suspensión inicial y diluciones
        
        innovación e incubación
        
        Decimales sucesivas
        
        Recuento de las coloninas
        
        Expresión de resultados
- - - - Fuente de luz
      - Filtros
      - Objetivos
    - - Disminución de fluorescencia
        
        Para utilizarlos necesitamos una bombilla que emita luz ultravioleta y luz visible. Para excitar el fluorocromo necesitamos un filtro de excitación que seleccione la longitud de onda que excita nuestro flurocromo.
      - se utiliza para
        
        La microscopía de fluorescencia o epifluorescencia se utiliza para detectar sustancias con autofluorescencia como la vitamina A o sustancias marcadas con fluorocromos.
        Se pueden realizar estudios de colocalización e interacción, así como observar las concentraciones de iones y procesos intra y extracelulares como la endocitosis y exocitosis
      - Variables que afectan la fluorescencia o epifluorescencia
        
        Rendimiento cuántico
        
        Estructura
        
        Rigidez estructural
        
        Temperatura y disolvente
        
        Efecto de pH
        
        Efecto de la concentración
- - - - Una fosfatasa es una enzima (EC 3.1.3) del grupo de las esterasas que cataliza la eliminación de grupos fosfatos de algunos sustratos, dando lugar a la liberación de una molécula de ion fosfato y la aparición de un grupo hidroxilo en el lugar en el que se encontraba esterificado el grupo fosfato
        
        Utilidad de la técnica: determinación de la actividad enzimática del suelo
        
        Tipo de muestra que se puede analizar: Sustrato orgánico del suelo
        
        Resultados esperados: Se obtendrá la actividad fosfomonoesterasa expresada en moles de p-nitrofenol liberado en g-1h-1