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Técnicas de ecología microbiana. Ecologia_microbiana1 - Coggle Diagram

- - - - Etapas.
        
        Preparación de la muestra, suspensión inicial y diluciones
        
        Inoculación e incubación
        
        Recuento de las colonias
        
        Expresión de resultados
- - - - Agregar al portaobjetos, fenólico Rosa durante 5-10 minutos. Ver en el microscopio.
- - - - Fuente de luz
        
        Filtros
        
        Objetivos
- - - - Una fosfatasa es una enzima (EC 3.1.3) del grupo de las esterasas que cataliza la eliminación de grupos fosfatos de algunos sustratos, dando lugar a la liberación de una molécula de ion fosfato y la aparición de un grupo hidroxilo en el lugar en el que se encontraba esterificado el grupo fosfato.
        
        Utilidad de la técnica: determinación de la actividad enzimática del suelo
        
        Tipo de muestra que se puede analizar: Sustrato orgánico del suelo
        
        Resultados esperados: Se obtendrá la actividad fosfomonoesterasa expresada en moles de p-nitrofenol liberado en g-1h-1
  - - - Para mejorar la disponibilidad del nitrógeno, se emplean microorganismos fijadores de nitrógeno, dentro de los que se distinguen dos grupos: los microorganismos “simbióticos” que fijan nitrógeno en asociación con plantas, estos microorganismos llamados rizobios colonizan y forman nódulos en las raíces de las plantas donde el nitrógeno gaseoso se reduce a amonio; y los microorganismos de tipo “asimbióticos” (o de vida libre) que proporcionan al medio compuestos nitrogenados como amonio, aprovechados por los vegetales. La tasa de fijación de nitrógeno de los rizobios simbióticos suele ser superior a la tasa de fijación por bacterias asimbióticas. A pesar de esto, gracias a la disponibilidad de compuestos orgánicos procedentes de raíces, la tasa de fijación de nitrógeno de bacterias asimbióticas como Azotobacter es mayor en la rizosfera que en el suelo libre de raíces.
        
        Utilidad de la técnica: Aislar microorganismos de medios de cultivos libres de nitrógeno en Ashby y el medio para Fijadores Biológicos de Nitrógeno (FBN Sobiotech).
        
        Tipo de muestra que se puede analizar: Raíces de diferentes cultivos con suelo adherido.
        
        Resultados esperados: Descripción morfológica de los microorganismos del género Azotobacter y Azospirillum
  - - - Existen diferentes procedimientos utilizados en la identificación y enumeración de los microorganismos capaces de utilizar la celulosa; siendo la base de estos la hidrólisis de sustratos celulósicos. La utilización de medios líquidos que contienen celulosa permiten estimar cualitativa y cuantitativamente los microorganismos degradadores, los medios sólidos generalmente más usados pero en estos las colonias de microorganismos que utilizan el sustrato son con frecuencia difíciles de diferenciar de otros microorganismos que no lo hacen.
        
        Utilidad de la técnica: Diferenciación de microorganismos celulolíticos y no celulolíticos
        
        Tipo de muestra que se puede analizar: Sustratos celulósicos del suelo
        
        Resultados esperados: Diferenciar los microorganismos celulíticos de los demás microorganismos observados en la muestra
- - - - Los papeles filtro en los cuales se retuvieron las esporas colocados en placas de Petri
      - Se observaron con un estereoscopio para realizar el conteo del número de esporas presentes
      - el número de esporas germinadas presentes en las muestras.
    - - Se tomaron cuatro muestras de suelo de 25 g y se colocaron en beakers.
      - Los agregados de suelo se trituraron con una espátula. A cada beaker se le añadieron 250 mL de agua destilada y las suspensiones se agitaron por una hora.
      - Estas suspensiones se hicieron pasar por tamices apilados (850μm, 250μm, 106μm y 63μm). Se añadió agua del tubo para facilitar el movimiento de las esporas.
      - El material retenido en los tamices de 106μm y 63μm se colocó en tubos Falcon y se suspendió en agua, se centrifugó por tres minutos a 2000 g y se removió el sobrenadante.
      - El sedimento se resuspendió en una solución de sacarosa al 50% y se centrifugó por dos minutos a 2000g.
      - El sobrenadante se hizo pasar por un papel filtro Whatman 5 y se hicieron dos lavados con agua destilada, utilizando un sistema de filtración al vacío.
      - Los diferentes papeles de filtro se colocaron en placas de Petri y se mantuvieron en refrigeración hasta el momento del conteo
- - - - Microorganismos implicados
        
        Por encima de esta zona pueden desarrollarse las bacterias púrpura que no utilizan el azufre. Cianobacterias y algas crecen en la parte superior y liberan oxígeno que mantiene aerobia esta zona.
        
        En la zona inferior de lodos crecen organismos que desarrollan procesos fermentativos que producen alcohol y ácidos grasos como subproductos de su metabolismo.