Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Tecniques immunologiques de tipus primari - Coggle Diagram
Tecniques immunologiques de tipus primari
EIA heterogenis (ELISA)
El ELISA utilitza Ag i Ac conjugats amb un enzim, a mes a mes de mantenir la seva activitat immunologica tambe te activitat enzimatica
Tipus d'enzims
Fosfatasa alcalina
Glucosa oxidasa
Peroxidasa de rave
Tipus d'ELISA
No competitiva
ELISA indirecta per a deteccio de Ac
ELISA sandwich Das per a det. Ag
ELISA directa per a deteccio de Ag
ELISA sandwich HADAS per a det Ag
Competitiva
ELISA competitiva per a det. Ac
ELISA competitiva per det. Ag
ELISA d'inhibicio per a det. Ac
ELISA d'inhibicio per a det. Ag
Tecnica Western-blot
Dot-blot
És un procediment senzill, variant de l’ELISA, que permet la fixació de proteïnes a membranes de nitrocel·lulosa, i la posterior detecció de components presents en petites quantitats en una mescla heterogènia i complexa
Western-blot
També es coneix com a immunotransferència o immunoblotting o Combina diversos procediments d’altres tècniques o Consta de tres fases:
transferència de les proteïnes separades a un suport, on tindrà lloc la
immunoreacció
reconeixement de les proteïnes mitjançant tècniques de revelat
separació de les proteïnes, generalment per electroforesi SDS-PAGE
Transferència de proteïnes
Tècnica que engloba un grup de mètodes dissenyats per a immobilitzar proteïnes sobre membranes sintètiques i una posterior tinció per a detectar-les
Immunofluorescencia
Luminiscencia
La luminescència es defineix com l’emissió de llum associada amb la dissipació d’energia d’una substància que s’excita electrònicament
Fluorescencia
La fluorescència és un dels fenòmens de luminescència
Quimioluminescència
Les substàncies més comunes que emeten quimioluminescència son :
peròxid àcid
hidròxid de sodi
èster d’acridina
fosfatasa alcalina
Assajos immunofluorescents
Es basa en la troballa de l’Ag en sèrum o en els teixits del pacient mitjançant una reacció amb un Ac que té acoblat a la porció Fc una substància fluorescent o fluorocrom.
Hi han 3 tipus
Immunofluorescència indirecta
Immunofluorescència de tinció del complement
Immunofluorescència directa
Enzimoimmunoassajos (EIA) homogenis
EIA homogeni
Son metodes d'analisis rapids i senzills
Permet l'automatizacio
La seva sensibilitat es menor que la dels EIA heterogenis
Te reaccions d'enllaç competitiu entre l'Ag de la mostra i el mateix Ag marcat amb un enzim
EMIT
S'aplica per a detectar i quantificar drogues o algunes proteïnes en serum i sang
Tecniques EIA
La EIA te 3 caracteristiques
Elevat poder catalitic
Alta especificitat dels enzims
Espacificitat dels Ac
Gracies al EIA es pot estudiar
Hormones
Farmacs
Pèptids i proteïnes
Vitamines
Agents patogens
Autoanticossos
Les tecniques EIA utilitzen enzims com a marcadors del imunocomplex
Radioimmunoassajos (RIA)
Aquests assajos utilitzen isòtops radioactius com a marcadors
Els emissors més utilitzats en els RIA son el carboni 14 (14C), el triti (3H) i el iode 125 (125I)
En el lab. s'utilitza el dosímetre personal que és un dispositiu dissenyat per a la vigilància radiològica individual del personal exposat a les radiacions ionitzants.Permet acumular la informació sobre la quantitat de dosi rebuda deguda a aquestes radiacions
Per a la detecció i/o quantificació de:
detecció de marcadors tumorals
mesura de nivells d’hormones
detecció de patògens
recerca en neurotransmissors
narcòtics
RIA directe o competitiu
unió competitiva entre Ag* i Ag no marcat pel lloc d’unió a l’Ac
Per a conèixer la concentració de l’Ag problema es fa servir una corba patró que relaciona la mesura de la radioactivitat emesa per l’Ag traçador dels controls i calibradors utilitzats en l’assaig amb l’Ag problema
IRMA
Per a aquesta variació de la tècnica s’utilitzen Ac
anti-Ig marcats com a traçadors
Immunocromatografies
Metodes directes
Per a la deteccio d'Ag associats a Mo, existeixen proves per a determinar:
Gastroenteritis
Meningitis i encefalitis
Infeccions respiratories
ETS
Sepsis
Metodes indirectes
Per a deteccio d'Ac
Kits de diagnostic rapid
Son kits rapids, segurs i facils de d'interpretar
S'utilitza aquesta tecnica tant per el diagnostic microbiologic com en la deteccio de molecules de diversos tipus.
Immunocromatografies Sars-Cov-2
Aquests tests son mes rapids que les proves PCR
Prova directa
La mostra directa necessita mostra respiratoria d'hisops nasofaringis per poder detectar les proteïnes, es tracta d'un immunoassaig qualitatiu.
Prova indirecta
Per a detectar la IgG i IgM especific, permet saber:
No la esta pasant (no IgM, IgG)
Ja ha passat la malaltia (IgG)
Si el pacient la esta pasant (IgM)