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Hemostasia primaria, Prueba de Rumpel-Leede, Tiempo de sangrado (Método de…
Hemostasia primaria
Prueba de Rumpel-Leede
Revisar la cara anterior del paciente marcando lunares y manchas
Medir la presión arterial
Calcular la media de la presión sistólica y diastólica
Colocar el brazalete del esfigmomanómetro a 5 cm de la fosa cubital
Insuflar hasta ejercer una presión equivalente a la presión arterial media
Retirar el esfingomanómetro y esperar 2 min para revisar la aparición de petequias
Contar las petequias
Tiempo de sangrado (Método de Duke)
Dar masaje al lóbulo de la oreja
Limpiar el lóbulo de la oreja con una torunda con alcohol al 70 %.
Puncionar el lóbulo con una lanceta. Poner en marcha el cronometro cuando salga la primera gota de sangre.
Dejar que la sangre salga sin ejercer presión
Con el papel filtro adsorber la gota de sangre sin tocar el lóbulo
Detener cronómetro y registrar el tiempo
Conteo plaquetario (frotis sanguineo)
Utilizar la muestra del tubo de sangre con EDTA
Mezclar por inmersión y con un capilar tomar una alícuota y hacer un frotis delgado y homogéneo
Teñir con la tinción de Wright 6 min. y 12 min. con la mezcla de buffer colorante
Decantar y enjuagar.
Observar al microscopio 10x, 40x y objetivo de inmersión.
Buscar una zona en la que las células no estén superpuestas
Contar el no. de plaquetas en 10 campos y obtener el no. de plaquetas por campo.
Tiempo de retracción del coagulo
Introducir una espiral de alambre de cobre en el tubo de sangre sin anticoagulante. Incubar 1hr a 37C
Retirar el coágulo y centrifugar a 2500 rpm por 1 min.
Medir el volumen del suero con una pipeta graduada
Referir este volumen como porcentaje del volumen inicial.
Adhesividad plaquetaria (Técnica de Prost)
Centrifugar el tubo No.3 a 1,000 rpm por 10 min. Transferir el sobrenadante (plasma
rico en plaquetas) a un tubo de plástico y rotular como PRP.
En un tubo de plástico, preparar una dilución (1:250) del PRP utilizando oxalato de amonio
al 1 % como diluyente.
Preparar 4 jeringas con capacidad de 5 mL colocando 15 perlas de vidrio en c/u y tapar con
papel parafilm la parte inferior
Rotular cada jeringa como No.1,
No.2, No.3 y No.4 respectivamente.
Agregar 2.5 mL de PRP a la jeringa No.1 sellada con parafilm. Tapar con su embolo y mezclar
suavemente por inversión durante 60 segundos (1er pase)
Pasar la muestra de la jeringa No.1 a la jeringa No.2. Tapar la jeringa No.2 con su embolo y mezclar suavemente por inversión durante 60 segundos (2do pase)
Repetir el paso anterior 2 veces más.
Separar en un tubo para microcentrifuga 50 microlitros de la muestra contenida en la jeringa No.4 (4to pase)
Realizar una dilución (1:50) de la muestra rotulada como AP 4to
pase y contar en la cámara de Neubauer para calcular las plaquetas/mm3
Extraer 10mL de sangre venosa y repartir en los 3 tubos