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Aplicaciones y técnicas de diagnóstico mediante el uso de cultivos…
Aplicaciones y técnicas de diagnóstico mediante el uso de cultivos celulares.
Cromosomas
¿Qué son?
Estructuras formadas por ADN compacto proteínas y polisacáridos y se encuentran en el núcleo.
¿Cuántos hay?
Tenemos 23 pares. 22 son autosómicos y 1 par sexual
Tipos
Submetacéntricos: el centrómero se encuentra un poco desplazado hacia uno de los lados dando lugar a una pequeña diferencia de longitud entre los dos brazos.
Acrocéntricos: el centrómero se encuentra más desplazado hacia uno de los lados provocando una mayor diferencia de longitud entre los brazos.
Metacéntricos: el centrómero se encuentra en el medio dando lugar a dos brazos de similar longitud.
Telocéntricos: el centrómero se encuentra en un extremo provocando la presencia de uno de los brazos.
Aberraciones cromosómicas
¿Qué es?
Son defectos o alteraciones en la estructura o número de los cromosomas.
Tipos
Aberraciones numéricas
Poliploidías
Aneuploidías: monosomía trisomía
Aberraciones estructurales
Translocación
Inversión
Deleción
Citogenética
¿Qué es?
Ciencia que estudia los cromosomas y las enfermedades relacionadas con ellos.
Cariotipo
¿Qué es?
Conjunto de todos los cromosomas de un individuo. Otro concepto es el IDEOGRAMA que es la representación gráfica de los cromosomas, atendiendo a su tamaño y forma según la posición del centrómero.
Obtención
Recolección de la muestra. 2. Cultivo celular. 3. Adición de la colchicina. 4. Exponer la muestra a una solución hipotónica para que el núcleo libere los cromosomas. 5. Lavados con solución fijadora.
Colocar la muestra en portaobjeto. 7. Tinción.
Técnicas de bandeo
Son
Tinción de los cromosomas de una muestra, observándose como resultado diferentes bandas en dichos cromosomas.
Tipos
Bandeo Q
Colorante: quinacrina. Resultados: bandas brillantes que corresponden con el alto contenido en A y T
Bandeo R
Colorante usado: quinacrina. Resultado: bandas oscuras (alto contenido en C y G) y bandas claras (alto contenido en A y T).
Bandeo G
Colorante: tripsina+ Giemsa. Se observan bandas oscuras (alto contenido de adenina y timina), bandas claras (alto contenido en citosina y guanina).
Bandeo C
Colorante: Giemsa. Resultados: tiñe regiones centroméricas de los cromosomas.
Bandeo NOR
Está es desuso
Micronúcleos
¿Qué son?
Son fragmentos de cromosomas o cromosomas completos fuera del núcleo
Test de micronúcleos
Técnica que permite analizar el efecto genotóxico de sustancias o factores ambientales.
Procedimiento: 1. Recolección de la muestra. 2. Cultivo celular. 3. Extensión de la muestra en portaobjeto. 4. Fijación de la muestra. 5. Tinción de la muestra. 6. Observación al microscopio.
Inmunomarcaje.
¿Qué es?
Utilización de AC marcados para la detección de antígenos en el tejido de estudio, basándose en la unión AG-AC
Western Blot
¿Qué es?
Técnica de laboratorio que permite conocer la concentración de una proteína en una muestra, basándose en la especificidad de reconocimiento de Ag- Ac
Procedimiento
Transferencia de proteínas.
Bloqueo de membranas
Separación de las proteínas
Detección de la proteína
Obtención y preparación de la muestra
Radioinmunoensayo
¿Qué es?
Técnica de laboratorio que usa isótopos radiactivos para marcar el complejo Ag- Ac
Elisa
¿Qué es?
Técnica de laboratorio que usa enzimas para marcar el complejo Ag- Ac.
Tipos
Elisa indirecto
Inmovilización del Ag en una placa. 2. Adición del Ac primario sin marcar. 3. Adición del Ac secundario marcado con la enzima. 4. Adición del sustrato.
Se utiliza para buscar los Ac para dicho Ag en el paciente
Elisa competitivo
Inmovilización del Ag de referencia sobre una placa/ Incubación de un exceso de Ac primario con la muestra que contiene el Ag de interés.
Adición del complejo Ag-Ac a la placa. 4. Lavado de la placa. 5. Adición a la placa de un Ac secundario marcado con la enzima.
Adición del sustrato.
Elisa directo
Inmovilización del Ag en una placa. 2. Adición del Ac primario marcado con la enzima. 3. Adición del sustrato.
Se utiliza para buscar el Ag en el paciente