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UD 6. APLICACIONES Y TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO MEDIANTE EL USO DE CULTIVOS…
UD 6. APLICACIONES Y TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO MEDIANTE EL USO DE CULTIVOS CELULARES
CROMOSOMAS
ABERRACIONES
=
ALTERACIONES
ALTERACIONES ESTRUCTURALES
defectos en la
ESTRUCTURA
de los cromosomas
TRASLOCACIÓN
cromosoma
SE ROMPE
fragmento suelto
SE UNE A OTRO
cromosoma
INVERSIÓN
INTERCAMBIO
de
material genético
dentro del
MISMO
cromosoma
DELECIÓN
cromosoma
PIERDE
material genético
resultado
INCOMPLETO
ALTERACIONES NUMÉRICAS
defectos en el
NÚMERO
de cromosomas
en
ALGUNOS PARES
de
cromosomas
ANEUPLOIDÍAS
monosomías
en lugar de
2 cromosomas
homólogos hay
1 CROMOSOMA
trisomías
en lugar de
2 cromosomas
homólogos hay
3 CROMOSOMAS
en
TODOS LOS PARES
de
cromosomas
POLIPLOIDIAS
son
estructuras formadas por
ADN compactado
proteínas
polisacáridos
situados en el
núcleo de las células
.
tipos
SUBMETACÉNTRICO
CENTRÓMERO
está un
POCO DESVIADO
con respecto al centro del
cromosoma
brazos largos
sean
MÁS LARGOS
que los
brazos cortos
ACROCÉNTRICO
CENTRÓMERO
se encuentra
MÁS CERCANO A LOS EXTREMOS
del
cromosoma
(
telómeros
)
brazos cortos
sean
MUCHO MÁS CORTOS
que los
brazos largos
METACÉNTRICO
CENTRÓMERO
se encuentra en el
CENTRO
del
cromosoma
BRAZOS
cortos y largos
tienen la
MISMA LONGITUD
TELOCÉNTRICO
CENTRÓMERO
se encuentra en un
EXTREMO
del
cromosoma
solo existen
DOS BRAZOS EN TODA LA LONGITUD
del cromosoma =
brazo largo
partes
brazos cortos
centrómero
telomeros
brazos largos
cromátidas (hermanas)
CITOGENÉTICA
es
tipos
CITOGENÉTICA MOLECULAR
biología molecular
CITOGENÉTICA TRADICIONAL
ciencia
encargada del
estudio de los cromosomas
y de las
enfermedades relacionadas
con ellos
BANDEO CROMOSÓMICO
se usa
OBTENCIÓN DEL
CARIOTIPO
CARIOTIPO
conjunto
de todos los
cromosomas
que de un
individuo
IDIOGRAMA
representación gráfica
del cariotipo
ordenados por:
parejas homólogas
tamaño
forma y posición centrómero
PROCESO
teñir
mediante
TÉCNICAS DE BANDEO
consiste
TINCIÓN DE CROMOSOMAS
observándose en ellos
DIFERENTES
BANDAS
OSCURAS O CLARAS
tipos
BANDEO Q
3 more items...
BANDEO R
2 more items...
BANDEO C
2 more items...
BANDEO G
3 more items...
lavar con
solución fijadora
añadir
COLCHICINA
inhibidor mitosis
7.visualizar al
microscopio
cultivo de células
recoger
muestra
añadir
solución hipotónica
TEST DE MICRONÚCLEOS
TÉCNICA
PROCEDIMIENTO
extensión
portaobjetos
fijación
con
etanol 80%
cultivo
de células
tinción
con
H.E o naranja de acridina
recolección
muestra
microscopio
permite
analizar
el
EFECTO GENOTÓXICO
(tóxico para genes, produce mutaciones) de
sustancias
o
factores
ambientales.
MICRONÚCLEOS
son
agrupaciones
FUERA DEL NÚCLEO
de
FRAGMENTOS
de cromosomas o cromosomas
COMPLETOS
TÉCNICAS PARA EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS
RADIOINMUNOENSAYO
isótopos
TÉCNICA
permite conocer la
CONCENTRACIÓN
de una
PROTEÍNA
basándose en el
RECONOCIMENTO
Ag-Ac
lectura con
RADIOACTIVIDAD
VENTAJA
elevada
sensibilidad
IN CONVENIENTE
trabaja con material
radiactivo
INMUNOENSAYO ENZIMÁTICO (
ELISA
)
enzimas
ELISA INDIRECTO
mide
Ac
inmovilización del Ag
sobre placa
adición de
Ac primario
adición de
Ac secundario marcado
adición
sustrato
ELISA COMPETITIVO
inmovilización del Ag de referencia
sobre una placa
incubación
de un
exceso de Ac primario
con la
muestra
que contiene el
Ag
de interés
mide
Ag
adición del
complejo Ag-Ac
a la placa
lavado
de la placa (eliminación de complejos Ag-Ac solubles
adición a la placa de un
Ac secundario marcado
adición del
sustrato
ELISA DIRECTO
mide
Ag
inmovilización del Ag
sobre placa
adición de
Ac primario marcado
adición
sustrato
INMUNOBLOTTING O WESTERN BLOT
cromógeno
VENTAJAS
detecta proteínas
muy pequeñas
detecta
a la vez varias
proteínas
elevada
sensibilidad
elevada
especificidad
IN CONVENIENTES
requiere
precisión
elevado
coste
técnica
destructiva
TÉCNICA
permite conocer la
CONCENTRACIÓN
de una
PROTEÍNA
basándose en el
RECONOCIMENTO
Ag-Ac
FASES
OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN
DE LA MUESTRA
detergentes
para romper estructura celular y solubilizar las proteínas
a
4ºC
para evitar la acción de las proteasas
desnaturalización proteínas con
SDS
SEPARACIÓN
DE LAS
PROTEÍNAS
con
ELECTROFORESIS
EN GEL (SDS-PAGE)
TRANSFERENCIA
DE PROTEÍNAS
mediante
ELECTROTRANSFERENCIA
a
membrana
de nitrocelulosa o PVDF
BLOQUEO
DE MEMBRANAS
DETECCIÓN
DE LA PROTEÍNA
por
INMUNODETECCIÓN
directa o indirecta
producción de
BANDAS
A
MÁS GROSOR
indica MAYOR CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNA
POSICIÓN
indica
PESO MOLECULAR
DE LA PROTEÍNA
si se produce:
EXISTE
PROTEÍNA EN LA MUESTRA