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TECNOLOGÍA DEL ADN RECOMBINANTE, de esta forma localizaremos las células…
TECNOLOGÍA DEL ADN RECOMBINANTE
1 AISLAMIENTO Y OBTENCIÓN DEL GEN DE INTERÉS
mediante
ADN SINTÉTICO
SÍNTESIS DE ADN COMPLEMENTARIO
ENDONUCLEASAS DE RESTRICCIÓN
2 SELECCIÓN DEL VECTOR DE CLONACIÓN
vectores de clonación
tipos
GENOMAS DE ALGUNOS VIRUS
CROMOSOMAS ARTIFICIALES
Bacterianos
De levaduras
CÓSMIDOS
ADN vírico + ADN recombinante + extremos cos
empaquetado en BACTERIÓFAGO
que a su vez infecta la BACTERIA HOSPEDADORA
PLÁSMIDOS
moleculas de ADN circular presentes en bacterias
con ENZIMA DE RESTRICCIÓN cortamos la zona del PLÁSMIDO donde incluiremos el GEN DE INTERÉS y con ENZIMA LIGASA se une el PLÁSMIDO + GEN DE INTERES = dando lugar AL ADN RECOMBINANTE
se PONE EN CONTACTO ADN RECOMBINANTE CON CÉLULA HOSPEDADORA
pequeñas moléculas de ADN que tienen la capacidad para autoreplicarse dentro de las células hospedadoras
son
3 INTRODUCCION DE ADN RECOMBINANTE EN CÉLULA HOSPEDADORA
CARACTERÍSTICAS
de la célula hospedadora
Crecimiento rápido
No ser patógenas o peligrosas
Ser capaces de captar moléculas de ADN del medio externo e incorporarlas a la célula
4 SELECCION DE CÉLULAS CLONADAS Y EXPRESIÓN DE GENES EXÓGENOS EN EL HOSPEDADOR
FLUORESCENCIA
incorporando en el vector genes que codifiquen luminiscencia
ANTIBIÓTICOS
introduciendo en el vector genes con resistencia a los antibióticos
5 MULTIPLICACIÓN
6 OBTENCIÓN DEL PRODUCTO
de esta forma localizaremos las células hospedadoras que han incorporado el gen y lo expresan