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Antibiograma - Coggle Diagram

- - - - Son enzimas que fenotípicamente se caracterizan por conferir resistencia a penicilinas y cefalosporinas, incluyendo las de tercera y cuarta generación, a las oximino-cefalosporinas y al aztreonam.
      - Son enzimas producidas por los bacilos Gram negativos, fundamentalmente enterobacterias frecuentes en Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli y se inhiben por inhibidores de b-lactamasas
    - - Técnica de la doble difusión con discos
        
        Se basa en la sinergia de doble disco. Se utiliza una placa de agar Mueller-Hinton inoculada con una suspensión bacteriana sobre la que se colocan los discos de cefalosporina y el disco con el inhibidor de betalactamasa a determinada distancia de los discos de ácido clavulánico. Si aparece una ampliación entre los halos de inhibición en alguno de los antimicrobianos y el disco con el inhibidor de betalactamasa se considera que existe BLEE
        
        La cepa bacteriana a estudiar debe pertenecer de un cultivo fresco del que se pueda comprobar su pureza. Se transfieren de 1-2 colonias a un tubo con suero fisiológico estéril y se ajusta la turbidez 0,5 McFarland, con un Hisopo de algodón húmedo y se inocula en aga Mueller Hinton girando la placa en ángulos de 90°C y se deja secar durante 20min. Con unas pinzas estéril se colocan 5 discos de antibiotico presionándolos en el agar. Y se inoculan en aerobisis a 37°C por 24H
        
        En el centro se coloca un B-lactámico más un inhibidor de B-lactamasas , arriba se coloca un Monobactámico y abajo se coloca una cefalosporina de 4ta generación y a los lados una cefalosporina de 3era generación.
        
        (Calvo et al., 2011)
      - Resultados
        
        Positivo: Presencia de BLEE se manifiesta pro el efecto sinérgico del inhibidor y los discos---> efecto de pez de cola o balón futbol americano
        
        (Camacho Molina et al., 2004)
        
        Negativo: Ausencia de efecto sinérgico del inhibidor y los discos.
        
        (Camacho Molina et al., 2004)
  - - - Inóculo Bacteriano
        
        Realizar una suspensión del microorganismo en un tubo con solución salina a una turbidez del 0,5 de la escala de McFarland.
      - Siembra
        
        Introducir una torunda dentro de la suspensión e inocular en placas de Mueller Hinton, deslizando la torunda por la superficie del agar tres veces, en tres direcciones distintas y por último pasarla por la periferia del agar, para conseguir una siembra uniforme. Dejar secar la superficie inoculada.
        
        Depositar un disco de oxacilina de 1 µg y otro de cefoxitina de 30 µg, separados, sobre la superficie inoculada y dejar unos minutos a temperatura ambiente para permitir la difusión del antimicrobiano.
        
        Incubar a 35ºC durante 24 horas completas en atmósfera aerobia
      - Lectura de resultados
        
        La lectura de los halos de inhibición se realiza con la ayuda de una regla.
    - - Cefoxitina, mecA positivo (Halo de inhibición ≤ 21 mm.), mecA negativo (Halo de inhibición ≥ 22 mm.).
      - Oxacilina, mecA positivo (Halo de inhibición ≤ 17 mm.), mecA negativo (Halo de inhibición ≥ 18 mm.).
    - - La resistencia a meticilina se debe a la adquisición del gen mecA que codifica la proteína fijadora de penicilina PBP2a, que posee baja afinidad por los betalactámicos.
      - El fenotipo de resistencia a la meticilina en Staphylococcus se puede detectar en el laboratorio mediante la técnica de difusión con discos de oxacilina (1 µg) o cefoxitina (30 µg) por dilución en caldo o agar.
  - - - También se puede detectar esta inducción por el método de microdilución utilizando la combinación en el mismo pocillo de eritromicina (4 mg/L) con clindamicina (0,5 mg/L) además de pocillos individuales para determinar la CMI de la eritromicina y de la clindamicina por separado.
      - La cepa a estudiar debe ser una muestra fresca cultivadas en un agar sangre.La inducción de la resistencia por la eritromicina se puede detectar mediante el D-test consiste en utilizar un disco de eritromicina de 15 µg y otro de clindamicina de 2 µg colocados a una distancia de 15 o 20 mm, de modo que se observe un achatamiento del halo de inhibición.
        
        Incubar a 35-37ºC durante 18-24 horas
    - - A) Resistencia mediada por una bomba de expulsión activa (D-test negativo).Sensible a la clindamicina resistente a la eritromicina
      - B) Resistencia inducible a la clindamicina (D-test positivo). Esta cepa se debe informar como resistente a la clindamicina o indicar que se trata de resistencia inducible
    - - Son tres grupos de antimicrobianos de estructuras químicas diferentes pero con mecanismos de acción similares.La presencia de genes erm es el mecanismo más frecuente y confiere un fenotipo de resistencia resistencia a los macrólidos
  - - - Se encuentra principalmente en las K. pneumoniae, que se les confiere resistencia a las carbazepinas.Esta enzima presenta actividad contra un amplio espectro de antimicrobianos β-lactámicos que incluye penicilinas, cefalosporinas, cefamicinas y aztreonam.Las enzimas KPC hidrolizan de forma eficiente penicilinas, cefalosporinas y carbapenémicos.
    - - Consiste en tomar una cepa bacteriana (E. coli) que no genere resistencia en KPC, para así hacer una solución para inocular con la técnica de cesped para evaluarlo
      - Se coloca en un disco antibiótico que sea carbapenemico lo cual se coloca en el centro y se coloca 3 bacterias (una negativa, positiva y la bacteria sin reacción)
      - Se hace de forma directa, se incuba y se evaluan los resultados que se observa en K. pneumoniae, S. aureus y E. coli
    - - Se basa en la deformación del ala de inhibición según la bacteria: para K. pneumoniae es positiva (KPC (+)), para S. aureus es negativa (KPC (-)) y para E. coli positiva (KPC (+))
        
        (Morales & Valenzuela , 2011)
- - - - Neisseria gonorrhoeae
      - Streptococcus pneumoniae
  - - - Es importante obtener la muestra para cultivo y susceptibilidad a los antibióticos (antibiograma) antes de iniciar cualquier tratamiento antibiótico, a menos que el antibiograma se utilice para monitorizar la eficacia del tratamiento.