Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Altération épigénétique & Cancer - Coggle Diagram
Altération épigénétique & Cancer
Epigénétisme
= étude de toutes les modifs des gènes : modifs d'exp° sans que séq soit modifée → modifs transmissibles agissant sur trans° et post trans° (miARN)
Différents marqueurs
Méthyl° cytosine : CpG
SAM lie CH3 sur C
Ilots CpG au niv du prom (démétyl° maj)
Qq CpG dans régions codantes (méthyl° maj)
Maintien profil de méthyl° au cours des divisions par DNMT1
Inhibition trans° par encombrement du prom OU modif conformation de l'ADN
Rôle physio : inactivation X, empreinte génomique parentale (exp° monoallèlique d'un seul parent et repression stable tout au long de la vie de l'aute allèle), maintien intégrité génome
Acétyl° et méthyl° des histones
Nucléosome : ADN + 2H2A + 2H2B + 2H3 + 2H4
Modif post trad : accessibilité (euchromatine) ou compaction (héterochromatine)
Enzymes
HAT : neutraliser charge + des histones ainsi brin ADN prédomine en terme de charge ce qui permet de relacher ADN et favoriser trans° → acétyl°
HDAC : compaction en inhibant charges nég → déacétyl°
HMT
LSD1
Techniques d'études
Méthyl° ilots CpG
ADN modifié par bisulfite de sodium →
technique de frommer
: désamination oxydative par bisulfite qui convertit C en U → PCR
MSP = methyl-specific PCR
COBRA = COmbined Bisulfite Restriction Assay/Analysis
: Bisulfite-PCR → Quantification par digestion par ER, PAGE, hybridation oligont, phosphoimager quantitation
Pyroséquençage
: dosage luminométrique du pyrophosphate produit après ajout d'une base durant la réaction de polymérisation
Séquençage haut débit
ChIP
Principe : étudier sur une portion de l'ADN la présence d'histones acétylés ou méthylés
1) Pontage covalents ADN/prot par formaldéhyde 2) Lyse des cell et fragmentation de la chromatine 3) IP 4) Inversion des pontages et extraction de l'ADN 5) qPCR avec primers spé pour différentes régions OU couplage à un séq haut débit
Méca épigénétique et cancer
Hyperméthyl° de prom
Inact° GST
GST impliqués dans ctrl cycle, apoptose, réparation ADN, adhésion cell, angio, carcinogènes
Méthylation = event précoce
Corrélation entre degré méthyl° tumeur et ADN tumoral circulant au niv des fluides bio → diagnostic et surveillance après ttt
Profil méthyl° : pronostic et aide diagno
Hypométhyl° globale : Cas des cellules cancéreuses de manière globale favorisant instabilité chromosomique
Epigénétisme et thérapeutique
Inhibiteurs des DNMT
Inhibiteurs : 5-azacytidine et 5-azadéoxycytidine (Decitabine)
Le groupement aza bloque l'action de la DNMT et donc bloque la méthyl° des CpG → agents hypométhylant
DNMT = ADN méthyl transferase
Effets sur lignées cellulaires des cancers : apoptose, inhibition prolif, exp° p16 et p15, dif° cellulaire
Syndrome myélodysplasique : 2002 phase III encourageante, taux de réponse globale 61% et allongement du délai de transformation en leucémie aiguë → 2007 diminution taux de transformation en leucémie aiguë, allongement médiane survie, amélioration qualité de vie et bonne tolérance
Inhibiteurs des HDAC
Trichostatine A (TSA), acide valproïque, suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA) → arrêt du cycle en G1/2, surexp° p21 et apoptose
Mbrx essais cliniques seuls ou en asso
Approuvé par FDA pour lymphome T cutanée
Asso inhibiteurs HDAC et DNMT → potentialisation des effets in vitro et in vivo