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Métodos de Estudo em Histologia, Artefatos: elementos não naturais do…
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Fixação química: imerge o material em soluções contendo agentes desnaturantes ou que agentes que estabilizam as moléculas ao formar pontes com moléculas adjacentes. As soluções são denominadas de fixadores.
- Os fixadores mais utilizados são o formaldeído e glutaraldeído.
- Consiste na infiltração das estruturas em substâncias que as deixem com uma consistência rígida.
Desidratamento, clareamento, infiltração e inclusão
Métodos: desidratação (álcool), clareamento (xilol ou toluol), ,infiltração (parafina aquecida, preenche espaços internos e externos das estruturas), inclusão (blocos enrigecidos, vão ao micrótomo para serem fatiados)
- Evitar que os fragmentos endurecam;
- Manter a composição molecular e a estrutura dos tecidos
- Possui como função evitar a digestão das células, tecidos ou órgãos dessas próprias estruturas e em bactérias tem como função:
*Fixação física: congela-se os tecidos e depois cortam eles com cristotato ou criomicrótomo. A vantagem desse processo é que ele não inativa grande parte das enzimas e mantém as proteínas em suas conformações e locais naturais.*
Função: colorir os tecidos, uma vez que a maioria é incolor.
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Os componentes dos tecidos que possuem afinidade por corantes básicos são chamados de basófilos e os que tem afinidade por corantes ácidos acidófilos
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Outra técnica utilizada é a impregnação metálica , usada, principalmente para tecidos do sistema nervoso. Nessa técnica os fragmentos ao invés de passar pela coloração, são tratados com substâncias que contém metais.
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O poder de resolução corresponde à distância entre duas estruturas que permitem elas serem vistas como dois corpos separados.
O poder de resolução da miscrospia de luz é de aproximademnte 0,2 um
Microscópio de contraste de fase: Constituído por um sistema de lentes que formam imagens visíveis de estruturas quase transparentes.
Microscópio de contraste diferencial de interferência: permite visualizar objetos quase transparentes e aparentemente em 3D.
Microscopia eletrônica de transmissão: capaz de formar imagens da composição estrutural interna em preto e branco
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A radioatividade é usada aproveitando a capacidade de alguns tipos de emissões radioativas sensibilizarem emulsões fotográficas.
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Associado ao isolamento do material e à alocação do mesmo em placa de Petri com uma solução semelhante a que esse material é banhado.
É uma técnica usada para purificar e isolar os componentes dos tecidos e células. Essa técnica é desempenhada por meio da força centrífuga e do coeficiente de sedimentação.
Constituem os métodos que localizam e identificam substâncias, seja nas células, seja na matriz extracelular. As técnicas têm como base reações químicas específicas ou interações de alta afinidade entre as moléculas.
Marcadores; são compostos que interagem especificamente e se ligam a moléculas que se busca detectar. Marcadores podem ser substâncias fluorescentes, átomos radioativos, moléculas de enzimas, metais, entre outras.
É o método que possibilita identificar por meio de anticorpos, moléculas ou cortes em células cultivadas. Pode ser desenvolvido por meio de técnica direta ou indireta.
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A hibridização consiste na ligação entre duas moléculas de cadeia única de ácidos nucleicos (DNA com DNA, RNA com RNA ou RNA com DNA) que se reconhecem um ao outro se as suas sequências forem complementares, formando moléculas de cadeia dupla.
A hibridização torna possível a identificação de sequências específicas de DNA ou RNA, localizar um gene em um cromossomo ou identificar as células em que um gene específico está sendo transcrito.
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O corte histológico é o procedimento mais utilizado no estudo histológico em microscopia de luz, acontece logo após a captação das amostras
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Estruturas podem ser identificadas mediante a interação com substâncias, as quais elas possuem afinidades.
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O observador deve-se conscientizar que o material seccionado representada apenas uma parte das estruturas.
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