Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
kháng sinh đồ, kỹ thuật khoanh giấy kháng sinh khuếch tán, pp sinh học xđ…
kháng sinh đồ
ý nghĩa
giúp cho thầy thuốc chọn được kháng sinh và liều lượng thích hợp
nhằm nâng cao hiệu quả điều trị
hạn chế hiện tượng kháng kháng sinh của vk
cung cấp các bằng chứng dịch tễ học
về xu hướng đề kháng kháng sinh của các vk trong từng giai đoạn, từng khu vực
là cơ sở để xây dựng hướng điều trị kháng sinh
là kĩ thuật xác định độ nhạy cảm của vk đối với các loại kháng sinh
kỹ thuật khoanh giấy kháng sinh khuếch tán
dựa trên nguyên lý
khuếch tán kháng sinh từ khoanh giấy vào môi trường thạch
mức độ khuếch tán tùy thuộc vào phân tử lượng của từng loại kháng sinh
và độ dày của môi trường thạch
nồng độ kháng sinh càng gần khoanh giấy càng cao, càng xa khoanh giấy càng giảm
những vùng xung quanh khoanh giấy
do nồng độ kháng sinh còn cao nên vk không mọc được
vùng ức chế
đường kính vùng này càng lớn chứng tỏ khả năng nhiễm của vk đối với kháng sinh càng cao hay vk nhạy cảm với kháng sinh
ngược lại vk mọc sát mép khoanh giấy thì vk đó không nhạy cảm với kháng sinh được tẩm trong khoanh giấy
ưu điểm
có thể thử nhiều loại kháng sinh trên cùng 1 loại vk
nhược điểm
không áp dụng được cho vk kị khí ở cơ sở không có trang thiết bị cần thiết
môi trường thử
môi trường thạch
mueller - hinton
độ dày: 4 +- 0,5mm
chủng vsv kiểm định
chủng gây bệnh được phân lập từ bệnh phẩm của bệnh nhân
đĩa petri
đương kính 9cm, có đáy phẳng
khoanh giấy
nồng độ tẩm kháng sinh vào từng khoanh giấy phụ thuộc vào từng loại kháng sinh và cơ sở sx
đường kính 6mm
đặt các khoanh giấy kháng sinh lên bề mặt thạch
khoảng cách giữa các khoanh lớn hơn 2cm, cách thành đĩa > 1,5cm
đánh giá kết quả
độ S (nhạy cảm)
vk nhạy cảm với kháng sinh
nhiễm trùng do vk gây ra sẽ đáp ứng điều trị bằng kháng sinh thử nghiệm ở liều lượng khuyến cáo
trong các kháng sinh có cùng độ S
nên lựa kháng sinh có phổ hẹp, có tác dụng điều trị với vk thử, ít tác dụng và có hiệu quả về kinh tế
độ I trung gian
kháng sinh có thể dùng cho điều trị với liều cao hơn nhưng phải cân nhắc kỹ lợi - hại cho bệnh nhân
độ R ( đề kháng)
vk không đáp ứng với kháng sinh và không được chọn để điều trị
đo đường kính vùng ức chế
các bước tiến hành
chuẩn bị môi trường thạch mueller - hinton
pha loãng hỗn dịch vk đạt nồng độ 10 ^6
đặt các khoanh giấy kháng sinh lên mặt thạch, cách nhau...
để các đĩa thạch ở nhiệt độ phòng 15'
ủ ấm 37 độ qua đêm
đo đường kính vô khuẩn
pp sinh học xđ hoạt tính sinh kháng sinh của xạ khuẩn mới phân lập
phương pháp pha loãng liên tục
phương pháp khuếch tán
dựa trên sự khuếch tán của kháng sinh vào môi trường thạch
các pp khuếch tán để xđ khả năng sinh tổng hợp kháng sinh của xạ khuẩn mới phân lập
pp đóng dấu kết hợp 2 lớp thạch
pp khối thạch
được dùng phổ biến nhất
đặc biệt được dùng để xđ hoạt tính kháng sinh khi vsv kiểm định và vsv sinh chất kháng sinh không phát triển trên cùng 1 môi trường
pp cấy vạch thẳng góc
chú ý
sử dụng hộp petri đáy phẳng, kích thước bằng nhau, vì độ dày của thạch ảnh hưởng đến tốc độ khuếch tán của chất kháng sinh
nồng độ chất kháng sinh được thử không quá cao
thời gian tiếp xúc của chất kháng sinh với môi trường phải được xđ
thành phần và pH môi trường, mật độ vsv kiểm định phải ổn định cho các mẫu thí nghiệm
xác định hoạt tính kháng sinh sd phương pháp khối thạch
môi trường kiểm định sau khi tiệt trùng ở 118 độ trong 30'
để nguội 45 - 50 độ
cấy vsv kiểm định và lắc đều
đổ hỗn dịch môi trường chứa vsv kiểm định vào hộp petri được đặt trên bề mặt phẳng và để mt đông lại
từ các hộp petri được nuôi xạ khuẩn phát triển tốt trong thời gian và nhiệt độ thích hợp
dùng đục kim loại hình trụ ấn nhẹ lên bề mặt thạch để tạo khối thạch có đường kính 6mm
dùng patuyn và đũa thủy tinh lấy các khối thạch đặt lên môi trường đã cấy sẵ vsv kiểm định
sau thời gian nuôi cấy trong tủ ấm thích hợp cho vsv kiểm định phát triển
đo và đánh giá kết quả vòng ức chế xung quanh các khối thạch