Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Approches protéiques - Coggle Diagram
Approches protéiques
Identification des prot
Séquençage d'Edman : dégradation pour isoler AA ensuite traités pour les stabiliser puis chromato pour identif°
-
-
Intérêt : comparaison + fiable et donc meilleure qualité identif°, il faut obtenir la masse mono isotopique sur le spectre expérimental → suffisamment discriminant pour associer à une entrée de notre base de données
-
-
-
Analyse MSMS
-
2e balayage avec fragmentation par collision d'un peptide ciblé grâce au MS → spectre MSMS = "après fragmentation"
-
Fragmentation peptidique : chq peptide est cassé une seule fois à chq liaison peptidique entre C=O et N-H
-
Intro
Structure primaire : liaisons peptidiques + secondaire : feuillets, hélices...
-
-
-
Difficulté de l'analyse
Liée à la gamme dynamique de c° de prot : mg/mL, µg/mL ou copies/cellules
-
-
-
-
-
Analyses protéomiques
= étude de l'exp° protéique globale des organismes vivants au niv des cellules, tissus, fluides physio dans un env donné à un instant donné
Préparation échantillon
Solubilité satisfaisante
-
Détergent : neutre, ne modifie pas charge
Réducteur (DTT, 2mercaptoetanol (casse S-S))
-
-
-
-
-
Détection prot : bleu de coomassie (rare), nitrate d'argent, fluo (ordre du ng)
-