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腸內菌鑑定實驗 - Coggle Diagram

- - - - 以沾取菌的接種環在培養基上穿刺，輕輕插入 agar 液面中央
      - 放入培養箱(41°C-43°C)培養，待隔日觀察
  - - - 以沾取菌的接種環在培養基上穿刺，輕輕插入 Agar 液面中央
      - 放入培養箱(41°C~43°C)培養，待隔日觀察
  - - - 將培養皿劃分成五等分，並在後面依序寫上細菌的縮寫
      - 利用稀釋畫菌法(Streaking)以接種環將對應之細菌畫在 Agar 上
      - 放入 37°C 的 Incubator 中，靜待隔天觀察
  - - - 利用稀釋畫菌法(Streaking)以接種環將對應之細菌畫在 Agar 上
      - 放入 37°C 的 Incubator 中，靜待隔天觀察
      - 將培養皿劃分成五等分，並在後面依序寫上細菌的縮寫
  - - - 利用稀釋型畫線法(以取得單一菌落)
        以接種環將對應的細菌畫在 Agar 上
      - 放入 37°C 的 Incubator 中，靜待隔天觀察
      - 將培養基劃分成五等分，並在後面依序寫上菌的縮寫
    - - 大腸桿菌與克雷伯氏菌因為可以發酵乳糖，所以呈現粉紅色菌落
      - 志賀氏菌、變形桿菌與沙門氏菌因為無法發酵乳糖，
        所以呈現無色的菌落
- - - - Eosin Methylene Blue Agar(EMB):抑制 G (+)
      - S-S，Bismuth Sulfite Agar(BSA):
        抑制 Coliform Bacilli 和 Proteus
    - - Hektoen Enteric Agar(HE):綠色
        
        主要用來分離糞便中的病原菌，因其內含高濃度膽鹽會抑制革蘭氏陽性菌及大部分非致病性的革蘭氏陰性腸道菌
        
        乳糖、蔗糖(Sucrose)、水楊素(Salicin)是培養基內碳水化合物來源
        
        若細菌能代謝這些碳水化合物形成酸，
        培養基中的指示劑百里酚藍(Thymol Blue)在pH 1.2~2.8，
        由紅色漸變為黃色
        
        Salmonella 及 Shigella 無法發酵任一種醣類，
        只會代謝培養基中的 Peptone，產物為鹼性
        ，指示劑在 pH 8.0~9.6 黃色漸變為藍色
        
        內含硫代硫酸鈉(Sodium Thiosulfate，提供 S 元素)、
        檸檬酸鐵胺(Ferric AmmoniumCitrate，
        和 H2S 形成黑色 FeS 沉澱)，
        辨識如 Salmonella 這種能代謝硫化物產生 H2S 的細菌
      - Modified Semisolid Rappaport-Vassiliadis Medium(MsRV):藍色
        
        Modified Semisolid Rappaport-Vassiliadis Medium(MsRV):藍色
        
        用來偵測細菌的運動性，若細菌有鞭毛可四處遊走，在培養基內可看到以接種點為起點向
        外擴散形成混濁狀的暈(Halo)
        
        高滲透壓、含孔雀綠，在 41~43°C培養下，可抑制 Coliform，選擇性地讓 Salmonella 生長
      - MacConkey Agar(MAC):淡紅色
        
        用於篩選出革蘭氏陰性菌，
        因含有高濃度膽鹽、結晶紫等物質可抑制革蘭氏陽性菌的生長
        
        乳糖(Lactose)是培養基內唯一碳水化合物來源，
        可區分 Lactose-fermenting (+)/(-)
        
        若該細菌可發酵乳糖產生酸，培養基中的指示劑中性紅(Neutral Red)，在 pH 6.8 以下會呈現粉紅色，因此菌落為粉紅色，如大腸桿菌(E. coli)
        
        若無法利用乳糖，則菌落呈無色透明，如沙門桿菌(Salmonella)
      - Eosin Methylene Blue Agar(EMB):暗紅色
        
        伊紅(Eosin)及甲基藍(Methylene Blue)抑制革蘭氏陽性菌和一些挑剔性(Fastidious)革蘭氏陰性菌;
        大部分革蘭氏陰性菌則可以生長
        
        乳糖、蔗糖是培養基內碳水化合物來源，
        伊紅、甲基藍在酸性環境下會結合形成沉澱;
        若細菌可發酵培養基內的碳水化合物產酸，菌落中央會有沉澱物
        
        強力乳糖發酵者:E. coli，菌落有綠色金屬光澤(Metallic Sheen)
        
        較弱的乳糖發酵者:
        克雷伯氏菌(Klebsiella)、腸桿菌(Enterobacter)、
        沙雷桿菌(Serratia)等，菌落顏色偏向紫色
        
        不發酵乳糖:Salmonella、Shigella，菌落呈透明無色
      - Urea Agar:淡黃色
        用於測試細菌是否含有尿素酶(Urease);
        若具有尿素酶可將尿素分解成 NH3 及 CO2，
        兩者結合形成 NH4CO3 使得 pH 值升高，
        培養基添加有酸鹼指示劑酚紅，在鹼性環境下呈粉紅色