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préparations de lames histologiques - Coggle Diagram
préparations de lames histologiques
étape 1 : fixation
physique : par le froid
type de préparations
cyto-enzymolgiques
immuno-histochimiques
quand ?
Examen extemporané
appareil de débitage des pièces congelés
le cryostat
chimique
types de fixateurs chimiques
coagulants
les alcools
non coagulants
pour le microscope photonique : les aldéhydes
microtome
électronique: le tétroxyde d' osmium
ultramicrotome
le liquide de bouin
type de prépartions
pièces destinées à un durcissement (paraffine ou résines dures )
étape 2 : Le durcissement
étape 1 : inclusion
déshydratation
éclaircissement
imprégnation
étape 2 : Enrobage
étape 3 :microtomie
les blocs sont donc rabotés avant de les mettre entre les pinces du microtome
étalement et collage des coupes sur la lame
étape 4: Déparaffinage
étape inverse à l 'inclusion ( solvant ,alcool puis eau). C'est une phase de préparation à la coloration
ou?
cuves à rainures ou des batteries de Borrels
comment ?
2 bains de toluène chacun 5 min ensuite égoutter la lame ; ensuite hydratation en utilisant des bains d ' alcool à degré décroissant c'est à dire 2 bains d 'alcools absolu puis alcool à 75 puis eau et finalement égoutter la lame puis on procède à la coloration.
étape 5 : la coloration
les colorations de routine
HES ( hémalum - erythrosine - safran) ou HE sans safran
erythrosine : cytoplasme en rouge
safran : fibres conjonctives en jaune
noyau : en brun noir
la coloration trichrome de masson
noyau en noir
RE : gris
cytoplasme acidophile et les nucleoles : en rose
muscles en rouge
fibre de collagène en vert
les colorants anioniques et cationiques ou les deux
les colorants mordants
imporégnation métallique
techniques de préparation pour microscope électronique
l ' inclusion ( dans des résines dures comme l ' époxy ou l ' araldyte
l ' enrobage ( dans la même résine )
ultramicrotome
l ' élimination de la résine par des solvants comme acétone
le contraste est augmenté par des métaux opaques aux électrons ( en surface ou par imprégnation)
technique spéciale de préparation des pièces dures
étape 1 : inclusion dans les résines dures
2 - Enrobage dans les mêmes résines dures de l ' inclusion
3 - découpage par une tronçonneuse polisseuse
4 - Enlever la résine par le solvant
5 - coloration et montage des lames