Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
CÁCH PHA CHẾ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY MÔ TB THỰC VẬT - Coggle Diagram
CÁCH PHA CHẾ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY MÔ TB THỰC VẬT
2. Chuẩn bị môi trường
Thành phần các chất dinh dưỡng
Chất hữu cơ, Đường, axit amin, vitamin
Chất vô cơ, đa lượng, vi lượng
Nước dừa, nước khoai tây, casein, pepton
Các hợp chất không biết rõ thành phần
Cách pha chế dung dịch
Stock đa lượng MS
Pha thành 1L với các nồng độ sử dụng khi pha 1L môi trường MS là 100mL/L
Cân và dùng nước cất hòa tan lần lượt từng chất trong bécher cho tan hoàn toàn. Dùng ống đong 1L điều chỉnh cho đủ 1 lít.
Stock sắt MS
Pha thành 200 ml với nồng độ sử dụng khi pha 1L môi trường MS là 2mL/L
Na2EDTA 3730mg, FeSO4.7H2O 2780mg
Cân và hòa tan từng chất bằng 100mLnước cất trong mỗi becher riêng. Đặt 2 becher dung dịch lên bếp và gia nhiệt cho dung dịch ấm lên (có hơi nóng bốc lên là được. Khuấy đều và đổ dung dịch Na2EDTA vào ống đong 200mL rồi từ từ cho dd FeSO4 vào, vừa cho vừa khuấy đều. Để nguội rồi đổ vào bình tối và bảo quản trong tủ lạnh.
Stock vi lượng MS
Chuẩn bị các stock con
Dung dịch KI (83 mg/mL)
Dung dịch Na2MoO4.2H2O (25 mg/mL)
Dung dịch CuSO4.5H2O (2,5 mg/mL)
Dung dịch CoCl2.5H2O (2,5 mg/mL)
Cân 3 chất đầu tiên và hòa tan với nước cất trong từng bécher riêng. Cho từng dung dịch theo thứ tự vào ống 500 mL. Sau đó hút 1mL dung dịch trong stock của 4 chất tiếp theo cho vào ống đong, vừa cho vừa khuấy đều và thêm nước cất cho đủ 500mL
Thành phần các chất điều hòa sinh trưởng thực vật
Dung dịch BAP (1mg/mL)
Dung dịch IAA ( 1mg/mL)
Dung dịch IBA (1mg/mL)
Dung dịch NAA (1mg/mL)
Dung dịch Kinetin (1mg/mL)
Dung dịch 2,4-D (1mg/mL)
1. Lựa chọn môi trường
Môi trường nghèo dinh dưỡng:
Điển hình là môi trường White, Knop và Knudson C
Môi trường có hàm lượng chất dinh dưỡng trung bình
Điển hình là môi trường B5
Môi trường giàu dinh dưỡng
Điển hình là môi trường MS
3. Thực hành
Tiến hành pha Skoog I,II,III của môi trường MS
Pha stock vitamin Morel, Glycin, inosytol
Pha các stock chất điều hòa sinh trưởng như đã hướng dẫn