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Citotoxicidad Celular - Coggle Diagram
Citotoxicidad Celular
Primer día
Sacar caja de la incubadora
Observar cambios en coloración y/o apariencia
Llevar frascos a microscopio
Objetivo 10X
Anotar morfología de las células
Tripsinizar el medio
Centrifugar
800 rpm durante 5 minutos a 4ºC
Retirar sobrenadante
Agregar 2.4 mL de medio de cultivo para re suspender el botón
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Segundo día
Después de 24 horas eliminar el sobrenadante con la pipeta y deshecha en un vaso precipitado
En una microplaca agregar 200 μL de medio al pozo que será el control y 200 μL de medio con la toxina o sustancia que provoque proliferación a diferentes concentraciones
Incubar
27ºC y 5% CO2 por 24 horas
Tercer día
Observar morfología y registrar cambios
Después de 24 horas, agregar 10uL de reactivo MTT a cada pozo.
Incubar
Leer en un lector de placas
Anotar absobancias
560nm
3 horas a 37ºC y 5% CO2