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MÉTODOS DIAGNÓSTICOS DE INMUNOLOGÍA: ANÁLISIS DE POBLACIONES CELULARES Y…

- - - - son generados
        
        Al inmunizar a un animal o un ser humano con antígeno una o más veces, extraer sangre del sujeto, y purificar los anticuerpos a partir del suero del sujeto.
        
        al añadir
        
        Adyuvantes a la preparación inmunizante desencadena una respuesta inmunitaria más fuerte al activar el sistema inmunitario innato para ayudar en la activación de células B y T específicas para antígeno.
      - son útiles para
        
        Técnicas como aglutinación o inmunoprecipitación, donde la capacidad del anticuerpo forma un complejo de antígeno-anticuerpo grande.
      - desventaja
        
        Algunos de los anticuerpos en la mezcla pueden tener reactividades cruzadas poco definidas con antígenos relacionados
    - - es el
        
        Producto de una célula B estimulada única
      - para generarlo
        
        Georges Köhler y Cesar Milstein fusionaron una célula B productora de anticuerpos, activada, normal, con una célula de mieloma, logrando generar un hibridoma.
        
        pero también
        
        Se tuvo que idear un método para eliminar híbridos de tumor-tumor de los cultivos de células fusionadas. Utilizaron células de mieloma que carecían de la enzima hipoxantina guanina fosforribosil transferasa (HGPRT), la cual es necesaria para la vía de salvamento en la síntesis de DNA.Hicieron crecer los cultivos en presencia de aminopterina quien incapacita la síntesis de DNA para finalmente morir.
      - proporcionan
        
        Un sitio de unión reproducible que fijará el anticuerpo a su célula o molécula blanco
      - puede
        
        Modificarse genéticamente de modo que sólo se retiene el sitio de unión, y el resto de la molécula es reemplazada por otra molécula.
  - - - cuando
        
        Anticuerpos y antígeno soluble se mezclan
        
        y su
        
        Naturaleza bivalente o multivalente de las inmunoglobulinas permite que una molécula de anticuerpo única se una a más de un antígeno
        
        finalmente
        
        El complejo unido con enlaces covalentes resultante se hace tan grande que se separa de la solución como un precipitado
        
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      - puede usarse para
        
        Purificar moléculas antigénicas a partir de una mezcla heterogénea de moléculas solubles, o para eliminar antígenos particulares de una solución.
    - - se formará
        
        Una línea de precipitación visible cuando el antígeno y el anticuerpo se difundan uno hacia otro en una matriz de gel.
        
        debido a las
        
        Concentraciones de anticuerpo-antígeno relativas a las cuales se maximiza la formación de enrejado, llamadas "equivalencia"
      - ofrecen
        
        Información respecto a la magnitud de la reactividad cruzada de preparaciones de anticuerpos con antígenos relacionados
  - - - es la
        
        Reacción de agrupación resultante cuando anticuerpos se unen a antígenos sobre la superficie de eritrocitos.
      - su
        
        Inhibición es útil para la detección de virus y de anticuerpos antivirales.
        
        debido a que
        
        Algunos virus portan proteínas o glucoproteínas multivalentes sobre su superficie, que interactúan con macromoléculas sobre la superficie del eritrocito, e inducen aglutinación.
    - - Sistemática para tipificar eritrocitos
        
        y para
        
        Tipificar antígenos ABO de ser humano, se mezclan eritrocitos de ser humano con antisueros contra los antígenos de grupo sanguíneo A o B
    - - Una infección bacteriana desencadena la producción de anticuerpos antibacterianos específicos para antígenos de superficie sobre las células bacterianas
        
        los cuales se puede
        
        Detectar mediante reacciones de aglutinación bacteriana
        
        también proporciona
        
        Información cuantitativa acerca de la concentración de anticuerpos antibacterianos en el suero de un paciente
        
        se da cuando
        
        1 more item...
  - - - se basan en
        
        La unión de anticuerpo o antígeno a un soporte de fase sólida
        
        su objetivo es
        
        Determinar la concentración de una citocina particular en la sangre de un paciente
    - - usa
        
        Anticuerpos o antígenos unidos de manera covalente a enzimas, lo que lo hace más seguro y menos costoso
      - ELISA indirecto
        
        detectará
        
        La cantidad de antígeno sobre la placa usando anticuerpos acoplados a enzima
        
        es el
        
        Mejor método para detectar presencia de anticuerpos séricos contra virus de la inmunodeficiencia humana (HIV)
      - ELISA sándwich
        
        se utiliza
        
        De manera sistemática un par de anticuerpos monoclonales específicos para regiones diferentes del antígeno
        
        Para detectar antígeno o medirlo
      - ELISA competitivo
        
        en cuanto
        
        Más alta es la concentración de antígeno en la muestra original, más baja es la señal final
      - se deben considerar
        
        Sistemas de enzimas disponibles
        
        las cuáles son
        
        La fosfatasa alcalina, la B-galactosidasa y la peroxidasa de rábano picante, cada una de las cuales puede usarse con sustratos cromogénicos.
        
        Sustratos cromogénicos, fluorogénicos o quimioluminogénicos
        
        Las modificaciones de ELISA usando interacciones de unión de biotina-estreptavidina
      - ELISPOT
        
        permite
        
        Detectar y cuantificar el número de células en una población que están produciendo citocinas particulares