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Métodos Moleculares, Aplicaciones, Bibliografía - Coggle Diagram
Métodos Moleculares
PCR
FUNDAMENTO
Reacción enzimática in vitro que amplifica millones de veces una secuencia específica de ADN durante varios ciclos repetidos en los que la secuencia blanca es copiada fielmente.
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ETAPAS
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HIBRIDACIÓN
Los primers se alinean al extremo 3’ del templado previamente separado e hibridan con su secuencia complementaria. A una temperatura entre 50-60 °C
EXTENSIÓN
La Taq polimerasa actúa sobre el complejo templado-primers y empieza su función catalítica a una velocidad muy rápida; agrega dNTP’s complementarios para crear las cadenas completas de ADN. La temperatura óptima para la reacción es de 72 °C.
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VARIANTES DE PCR
PCR MULTIPLEX
FUNDAMENTO
En el proceso de amplificación participan más de dos iniciadores amplificando en un único tubo varias secuencias dianas, permitiendo la detección e identificación simultánea de distintos genes
APLICACIONES
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Es aplicable en la detección/amplificación de cualquier gen, con independencia de lo que codifique.
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PCR ANIDADO
FUNDAMENTO
(Utiliza 2 pares de cebadores), se realiza la amplificación de una región del genoma, después se concreta la región mediante una segunda amplificación más específica.
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PCR EN TIEMPO REAL
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FUNDAMENTO
Utiliza primers marcados con fluoróforos que emiten fluorescencia que al ser al ser estimulados por un haz de luz a determinada longitud de onda, el cual permite el análisis de mutaciones cromosomales en nuestro agente infecciosos en estudio.
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SECUENCIACIÓN
Fundamentos
Determina el orden de los cuatro componentes básicos químicos (, llamados "bases", que forman la molécula de ADN.
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Bibliografía
Campos, P. (s.f.). Aplicaciones PCR. Obtenido de SlideShare: https://es.slideshare.net/paulinacamposgomez/aplicaciones-pcr
José M. Rubio, M. A.-T. (s.f.). Uso de PCR múltiple en el diagnóstico simultáneo de parasitosis. Obtenido de file:///C:/Users/Dell/Downloads/562-
Texto%20del%20manuscrito%20completo%20(cuadros%20y%20figuras%20insertos)-3104-1-10-20110930.pdf
MERCADO MICHEL, BRAYAN GABRIEL, & VASQUEZ MICHEL, ANETH. (2018). Estandarizacion de la PCR en tiempo real por análisis de curvas melting para la detección de tuberculosis drogoresistente. Revista CON-CIENCIA, 6(2), 111-122. Recuperado en 25 de octubre de 2021, de http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2310-02652018000200011&lng=es&tlng=es.
Tamay, L., Ibarra, C., & Velasquillo, C. (2013). Fundamentos de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y de la PCR en tiempo real. 2. https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2013/ir132d.pdf
