Please enable JavaScript.

Coggle requires JavaScript to display documents.

การตรวจวิเคราะห์วัตถุพยานด้วยเทคนิคอิมมูโนเนะ - Coggle Diagram

- - - - ig
        
        ig G พบมากใช้ตรวจวัด
        
        igA พบตัวแรกๆ
        
        igD
        
        igM
        
        igE
      - พบทั่วร่างกาย พัฒนาจากน้ำเลือด
      - สร้างจาก B lymphocite
      - ความไวสูง จำเพาะสุง
- - - - มี hapten เป็นโทรโข่ง ช่วยกระตุ้นให้สารอินทรียฺขนาดเล็กเป็นแอนติเจนได้
      - โปรตีน ดีที่สุด โพลีแซกคาไรด์รองลงมา ไขมันแย่สุด
      - ขนาดใหญ่ดีกว่า
    - - เอปิโธต่อเนื่อง
      - เอปิโธไม่ต่อเนื่อง สาเหตุจากการม้วนพับ
      - เอปิโฑป คือ บริเวณ เล็กของแอนติเจนที่จับกับแอนติบอดี
- - - - มีเอพิโธปเดียว จับชนิดเดียว จำเพาะเจาะจง แพงกว่า ซับซ้อน
    - - มีหลาย เอพิโทป
        
        การเตรียมเช่น ฉ๊ดโฮโมโกลบินคนให้กระต่าย กระต่ายมีภูมิ นำภูมิจากเลือดกระต่าย ไปทดลองจับกับเฮโมโกลบิน
        
        การเรียก-rabbit anti-x antibody , mouse anti-human homoglobin antibody
- - - - 1.แยกโปรตีน sds page
      - ย้ายโปรตีนจากเจลมายังแผ่น nitrocellulos
      - block ด้วย นมพร่องมันเนย albumin casein กันผล false
      - เติม anti ig antibody จำเพาะโปรตีน ที่สนใจ และมีฉลาก enzyme alkaline phosphatase
      - เติมสารเกิดปฏิกิริยากับฉลาก เกิดตะกอน โดยใช้BCIP/NBT
    - - 1-4 เหมือนเดิม
      - เติมanti แต่ไม่มี ฉลาก
      - เติม 2nd แอนติบอดี ที่ labeled with enzyme alkaline phosphatase
      - ซึ่งจะต้องเป็นตัวที่จำเพาะกับขาที่จับกับ แอนติเจน และเป็นสปีชีส์เดียวกัน โปรตีนต่างกันได้ขอแค่สปีชีส์เดียวกัน
  - - - AP alkaline phosphatase ดูได้เลย
        
        ใช้ PNPP เกิดเป็นสารเหลือง ตรวจวัดค่าการดูดกลืนแสงสีเหลือง
      - HRP HORSE radish PEROXIDASE สารเรืองแสงใช้เครื่องมือ อีไลซาต้องมีเครื่องอ่าน ตระกูลผักกาด วาซาบิ
    - - direct
        
        coating ลง เพลท บล็อกกิ้ง ใส่แอนติบอดีตรวจสอบมีฉลาก อ่านผล
      - indirect
        
        ต่างคือ ใส่แอนตืบอดี1 ที่จำเพาะ แล้วเติม 2 จากสปีชีส์ เดียวกัน
      - sandwich
        
        มี capture antibody มาเคลือบเพลทก่อน
        
        เติม แอนติเจน แล้วเติมตัวที่สอง ที่มีฉลาก (direct) หรือมีอีกแบบ indirect
        
        ประโยชน์ ตรวจแอนติเจนขนาดเล้กได้ หรือที่มันสกปรกปนเปื้อน
      - ข้อดีข้อเสีย direct เร็วกว่า ไม่ต้องกังวล cross react
      - ข้อดีข้อเสีย การเชื่อมแอนติบอดีเฉพาะเจาะจง กับเอนไซม์ยาก
      - competitve
        
        แก้ปัญหาแอนติเจนเล็กมาก กรณีติดฉลากที่แอนติเจน ตัวที่ติด แข่งกับไม่ติด ให้สัญญาณผกผัน
        
        กรณีที่ติดฉลากที่แอนติบอดี
        
        ผสม แอนติบอดีเจาะจงกับแอนติเจนต้องการหากับสารตัวอย่าง จะเหลือแอนติบอดีขี้แพ้ที่ไม่ได้จับ
        
        เตรียม เพลทเคลือบ แอนติเจนที่ต้องการหา
        
        ตัวขี้แพ้จับ ล้างส่วนที่จับกันไปแล้วกับปนเปื้อนออก
        
        เติมแอนติบอดีมีฉลาก แล้วเติมสารให้เกิดการเปลี่ยนสี