Les cellules de la fraction vasculaire stromale issues du tissu adipeux de grade clinique

Tissu adipeux

Graisse brune + graisse blanche (adulte)

Organe endocrine : secrétion de + 600 facteurs

Adipokine (leptine)

participent à l’adipogenèse, au métabolisme des adipocytes et à leurs fonctions, à l’inflammation, à l’immunité et à la reproduction.

10% du tissu se renouvelle / an

Présence de progéniteur d’adipocyte ADSC = sous type de CSM

Obtention : liposucions → lavage → digestion avec collagenase → dépôt : FVS pop hétero

ADSC

cell multi adhérente

dif° en chrondrocytes, osteoblastes, myocytes, adipocytes et cell neuronales

CD13+, CD73+ (ou CD146+), CD90+, CD45- (hématopoietique), CD11b-

capacité angio et immunorégulatrice

injection intra muscle au niv d'un membre ischémié : augmentation néovasc par sécrétion ck angiogéniques → augmentation flux sanguin et densité capillaires

après un infarctus : une amélioration de la fonction cardiaque, de la perfusion myocardique et une diminution de la taille de l’infarctus après injection intra artérielle de cellules ADSC ou de FVS

Injections FVS dans l'artère rénale après ischémie rénale chez le rat réduisent la mortalité et les lésions rénales

FVS chez l'animal

Capacité d'immunomodulation + imp chez femelle que mâle

CSM provenant de m-o, tissu adipeux et sang de cordon (immunogène)

ADSC

adhère au plastique

exp° de marqueurs de surface CD73, CD90, CD105 et abs marqueurs hématopoïétiques CD34, CD45, CD19, CD11a et HLA-DR

différenciation en ostéoblastes, adipocytes et chondrocytes in vitro

Capacité clonogénique - efficace pour tissu adipeux et ++ pour sang du cordon. Le + utilisé reste adipeux car + simple d'en avoir et moins invasif

Technique de carac : cyto, test clonogénique et de dif°

Obtention de la FVS en clinique

Méthode manuelle = SSCF : utilisation poche pour centri et lavage OU enzyme de grade clinique OU circuit clos +++ → pas de hotte mais tubulures (poche) avec seringues pour ne pas contaminer cell

Méthode automatisée = AP-HM : moins longue mais + cher et ctrl T°C pas possible (37°C normalement) → digestion enzymatique → culot FVS →

Leucocytes, macrophages 25 à 45%

Une minorité de CSH, pré adipocytes

Cellules endothéliales 10 à 20%

Péricytes 3 à 5%

Cellules stromales 15 à 30% = ADSC

Préparation FVS en clinique

Statut du produit thérapeutique : ne sort pas du bloc et est injecté pour la même fonction initiale

Pour réparation et patho ciblée

Conditions

Valider étapes de prép

Vérificaqtion équipement

Personnel habilité

Bionettoyage

Ctrl réguliers

Système management- qualité

Spécification pour liberer le produit

Nbr de cell minimum : 5-10-20 millions selon protocole

Rendement cellulaire = qualité cellulaire

Viabilité : min 70%

Caract° phénotypique

Potentiel clonogénique

• Pas d'effet secondaire sauf une étude qui montre une dif° en os
• Perspective : vésicule extracell d'après cordon