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Les cellules de la fraction vasculaire stromale issues du tissu adipeux de…
Les cellules de la fraction vasculaire stromale issues du tissu adipeux de grade clinique
Tissu adipeux
Graisse brune + graisse blanche (adulte)
Organe endocrine : secrétion de + 600 facteurs
Adipokine (leptine)
participent à l’adipogenèse, au métabolisme des adipocytes et à leurs fonctions, à l’inflammation, à l’immunité et à la reproduction.
10% du tissu se renouvelle / an
Présence de progéniteur d’adipocyte ADSC = sous type de CSM
Obtention : liposucions → lavage → digestion avec collagenase → dépôt : FVS pop hétero
ADSC
cell multi adhérente
dif° en chrondrocytes, osteoblastes, myocytes, adipocytes et cell neuronales
CD13+, CD73+ (ou CD146+), CD90+, CD45- (hématopoietique), CD11b-
capacité angio et immunorégulatrice
injection intra muscle au niv d'un membre ischémié : augmentation néovasc par sécrétion ck angiogéniques → augmentation flux sanguin et densité capillaires
après un infarctus : une amélioration de la fonction cardiaque, de la perfusion myocardique et une diminution de la taille de l’infarctus après injection intra artérielle de cellules ADSC ou de FVS
Injections FVS dans l'artère rénale après ischémie rénale chez le rat réduisent la mortalité et les lésions rénales
FVS chez l'animal
Capacité d'immunomodulation + imp chez femelle que mâle
CSM provenant de m-o, tissu adipeux et sang de cordon (immunogène)
ADSC
adhère au plastique
exp° de marqueurs de surface CD73, CD90, CD105 et abs marqueurs hématopoïétiques CD34, CD45, CD19, CD11a et HLA-DR
différenciation en ostéoblastes, adipocytes et chondrocytes in vitro
Capacité clonogénique - efficace pour tissu adipeux et ++ pour sang du cordon. Le + utilisé reste adipeux car + simple d'en avoir et moins invasif
Technique de carac : cyto, test clonogénique et de dif°
Obtention de la FVS en clinique
Méthode manuelle = SSCF : utilisation poche pour centri et lavage OU enzyme de grade clinique OU circuit clos +++ → pas de hotte mais tubulures (poche) avec seringues pour ne pas contaminer cell
Méthode automatisée = AP-HM : moins longue mais + cher et ctrl T°C pas possible (37°C normalement) → digestion enzymatique → culot FVS →
Leucocytes, macrophages 25 à 45%
Une minorité de CSH, pré adipocytes
Cellules endothéliales 10 à 20%
Péricytes 3 à 5%
Cellules stromales 15 à 30% = ADSC
• Pas d'effet secondaire sauf une étude qui montre une dif° en os
• Perspective : vésicule extracell d'après cordon
Préparation FVS en clinique
Statut du produit thérapeutique : ne sort pas du bloc et est injecté pour la même fonction initiale
Pour réparation et patho ciblée
Conditions
Valider étapes de prép
Vérificaqtion équipement
Personnel habilité
Bionettoyage
Ctrl réguliers
Système management- qualité
Spécification pour liberer le produit
Nbr de cell minimum : 5-10-20 millions selon protocole
Rendement cellulaire = qualité cellulaire
Viabilité : min 70%
Caract° phénotypique
Potentiel clonogénique