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ELISA DIRECTO - Coggle Diagram
CARACTERISTICAS
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ASPECTO NEGATIVOS
DIBICULTADA DE OBTENCIÓN DE CONJUGADO, PARA RECONOCE DIRECTAMENTE EL ANTÍGENO.
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SIRVE
DETECCIÓN DE UN ANTÍGENO RECOMBINANTE COMO POSILBE ANTÍGENO IMNUNÓGENO EN UNA VACUNA FRENTE AL VIRUS
MANEJO DE CONTROLES
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SIRVE PARA SABER QUE SE HA REALIZADO ADECUDAMENTE , REFERENCIA AL SABER CUALES SON + Y -
MUESTRAS + /-
DURANTE INCUBACIÓN EL SUSTRATO SE ROMPE EL OXIGENO GENERADO OXIDA AL OPD, CAMBIANDO EL COLOR.
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PROCEDIMIENTO
- BLOQUEAR POCILLOS PARA EVITAR ENTRADA DE OTRAS MOLECULAS NO DESEADAS.
SE AÑADE SUSTANCIA BLOQUENATE, UNA PROTEINA QUE NO REACCIONE CON NINGUN REACTIVO A TRABAJAR. SE INCUBA * 30 MIN A 37°C
- LAVADO DE PLACA CON TAMPÓN , PARA ELIMINAR ANTIGENOS QUE NO SE UNIORON AL ANTÍGENO
- ELIMINAR SOBRENADANTE, CON EL LA PROTEINA QUE NO SE HA UNIDO
- FIJACIÓN DEL ANTÍGENO A LA PLACA(POCILLO) INCUBAR A 37°C POR 20 MIN
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7.INCUBACIÓN CON EL CONJUGADO. ANADIR ANTICUERPOS CONTRA ANTIGENO, INCUBARSE JUNTO AL ANTÍGENO A 37°C
- SE RETIRA SOBRENADANTE, LAVAR 3 LAVADOS CON TAMPÓN.