Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Thérapie cellulaire & Myoblastes autologues - Coggle Diagram
Thérapie cellulaire & Myoblastes autologues
Muscle squelettique
Tissu le + abondant du corps humain
Tissu musculaire possède forte capacité de régénération =
myogénèse
Thérapie cellulaire & Régénération musculaire
Thérapie cellulaire allogénique
Prreuve du principe chez l'animal : transplantation myoblastes restaure exp° dystrophine chez souris mdx
Chez l'H : difficultés de migration cellulaire pour aller fusionner avec fibres musculaires ; mort cellulaire entre 70-80% des myoblastes dans les 3 premiers jours mais compensé par prolif des survivants ; rejet immunitaire
Thérapie cellulaire autologue
Insuffisance cardiaque : injection de myoblaste améliore fonction myocarde chez l'animal MAIS chez l'H incapacité de transdif° des myoblastes en cardiomyocytes
Incontinence urinaire : chez l'animal capacité des myoblastes à restaurer fonction sphinctère et faisabilité chez l'H
Incontinence anale : chez l'animal amélioration de la contractilité (pas de suivi et effectif limité cependant) et faisabilité chez l'H
Obstacle à la thérapie cellulaire : instabilité des cell in vivo?
Risque de transformation des cellules in vitro (cSE et iPS)
CSM : instabilité génomique pouvant conduire à émergence clones tumoraux
Myoblastes : aucun arguments → etude pré-clinique sur stabilité génomique des myoblastes humains
Thérapie cellulaire par greffe de myoblaste pour ttt insuffisance sphinctérienne anale : plan de validation
1) Preuve de principe
Dév chez le rat
Dispositif de mesure de la force contractile par manométrie perfusée : non invasif et longitudinal
Insuffisance durable induite par cryo-lésion de 90° du sphincter (x2)
Procédés de prod de myoblastes murins GFP+ : exp° marqueur caract
CD56
et de l'ARNm carac des cell myogéniques → efficacité de l'infection des myoblastes de ~70%
Éval de l’efficacité de la greffe intra-sphinctérienne de myoblastes
chez le rat : amélioration significative de la fonctionnalité (au moins 6 mois), réparation tissulaire, dif° des myoblastes greffés en fibre musculaire, fibres GFP+ au contact de la prot de neurofilament et du R à l'acétylcholine
Etude clinique : procédé de prod de myoblastes de grade clinique
Salle blanche : ttt de l'air, c° particulaire maîtrisée, ctrl périodique de l'env, bionettoyage
Fabrication médoc de thérapie innovante → réf de Bonnes Pratiques de Fabrication des médicaments = BPF
2) Prod myoblastes humains
Evaluation de la stabilité génomique
étude du caryotype/FISH → faible taux d'altérations chromosomiques et anomalies ne persistent pas au cours de la culture
analyse pangénomique comparative par CGHarray = recherche microremaniements non révélés par caryotype : abs variation nbr de copies de gènes
séquençage d'exome : abs variation au cours de la culture
senescence des myoblastes : perte de capacité prolif in vitro dans culture longue (perte de CD56)
recherche télomérase par RT-PCR (hTERT)
analyse transcrit p53 chez levure
etude abs tumorigénicité in vitro : culture en agar → tumeur si colonisation
etude tumorigénicité in vivo : injection à souris immunodef
Caractérisation des cellules : cyto et RT-PCR
3) Prod de runs précliniques en salle blanche conforme 4) Test de stabilité en seringue du médoc 5) Validation de la congélation/décongél 6) Media process test = ctrl asepsie
Essai clinique injection myoblaste pour IA phase II MIAS-01 : double aveugle contre placebo, monocentrique
Critère principal d'efficacité : amélioration à 6 mois du
score de Jorge et Wexner
→ 0 = continence normale à 20 = incontinence maximale (degrés, fréq de l'incontinence, protection, altération qualité de vie...)
Critères secondaires : diminution d'au moins 30% du score à 12 mois & Evolution du score de qualité de vie et tests fonctionnels
6 mois : 58% de patients répondeurs et amélioration maintenue
12 mois : même réponse que placebo
24 mois : certains arrêt incontinence et certains sans effets
Anomalie transitoire du caryotype et abs mut° p53 → résultats prod cliniques identiques à préclinique = intégrité génomique des myoblastes produits
Projet MIAS-02 phase III
Efficacité injection intrasphinctère de myoblastes autologues chez patients présentant IA par insuffisance sphinctérienne
Etude multicentrique ouverte randomisée avec groupe 1 myoblaste et groupe 2 neuromodulation sacrée (= ttt de ref donc pas placebo)
de 1 million d'€ donc arrêt car pas assez de sous mais d'autres études au Canada...
Thérapie cellulaire par greffe de myoblastes pour ttt du ptosis des
Dystrophies Musculaires Oculo-Pharyngées = DMOP
Myopathie rare (1/200 000) héréditaire autosomique dominante liée à mut° gène
PABPN1 = PolyA Binding Prot Nuclear
Atteinte sélective de 2 territoires : muscles releveurs des paupières sup →
Ptosis
& muscles du pharynx → trouble déglutition et phonation
Début 50-60ans puis aggravation avec dénutrition et pneumopathies d'inhalation
Diminution myogénicité sur les myoblastes issus du cricopharyngien
Thérapie cellulaire par autogreffe de myoblastes