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IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS - Coggle Diagram
IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
MICROSCOPIA
TINCIONES
ESTUDIO DIRECTO
KOH al 10%
KOH disuelve el material proteínico y facilita la detección de elementos Fúngicos no afectados
por ella.
Se pueden añadir colorantes como azul de algodón lactofenol.
Tinta china
Modificación del procedimiento de KOH
Principalmente para detectar el género
Cryptococcus
en el líquido cefalorraquídeo
La cápsula polisacárida del género
Cryptococcus
excluye la tinta.
Preparación en Fresco
Preparación no teñida
Suspendida en agua o suero salino.
Yodo de Lugol
Mejora el contraste de las estructuras
internas.
Facilita la diferenciación entre las amebas y los leucocitos del huésped.
TINCIONES ACIDORRESISTENTES
Tinción de Kinyoun
Tinción acidorresistente en frío (no precisa calentamiento).
Mismo principio que la tinción de Ziehl-Neelsen.
Auramina-rodamina
Los microorganismos tienen fluorescencia amarillenta-verde sobre un fondo negro.
Utilizan colorantes fluorescentes (auramina y rodamina) como tinción principal, y el permanganato potásico (oxidante fuerte) actúa como contratinción.
Tinción de Ziehl-Neelsen
Se utiliza para teñir micobacterias y otros microorganismos acidorresistentes.
Los microorganismos se tiñen con carbolfucsina básica y resisten a la descoloración con soluciones de ácido-alcohol.
Se realiza contratinción del fondo con azul de metileno.
Tinción acidorrersistente
modifcada
Se utiliza un decolorante débil con cualquiera de las tres tinciones acidorresistentes señaladas.
Los microorganismos que retienen este colorante se denominan
parcialmente acidorresistentes.
TINCIONES FLUORESCENTES
Tinción de
auramina-rodamina
Igual que las tinciones acidorresistentes.
Tinción de blanco
de calcoflúor
Se utiliza para detectar elementos fúngicos y el género
Pneumocystis
.
El colorante se une a la celulosa y la quitina de las paredes celulares; el microscopista puede mezclar el colorante con KOH
Tinción de naranja
de acridina
Se utiliza para detectar bacterias y hongos en muestras clínicas.
El colorante se intercala en el ácido nucleico (natural y
desnaturalizado).
Tinción directa con
anticuerpos fluorescentes
Los anticuerpos (monoclonales o policlonales) forman complejos con moléculas fluorescentes.
La técnica ha sido útil para detectar muchos microorganismos (como
Streptococcus pyogenes, Bordetella, Francisella, Legionella, Chlamydia, Pneumocystis, Cryptosporidium, Giardia
, virus gripal, virus del herpes simple).
TINCIONES DIFERENCIALES
Metenamina de plata
Detección tintorial
de elementos fúngicos en los tejidos
Precisa habilidad.
Tinción de azul de toluidina O
Principalmente para la detección de microorganismos del género
Pneumocystis
en muertras respiratorias
Los quistes se tiñen de color rojo-azul a morado oscuro robre un fondo de color azul claro.
Tinción de hematoxilina
Férrica
Se utiliza para la detección e identificación de protozoos fecales.
Tinción de Gram
Base para reparar los principales grupos de
bacterias
Grampositivas
Gramnegativas
Los microrganismos
gramnegativos retienen el colorante Safranina.
Tinción más utilizada en el laboratorio de microbiología
Tinción de Wright-Giemsa
Se utiliza para detectar
Parásitos sanguíneos, cuerpos de inclusión víricos y por clamidias.
Loa géneros
Borrelia, Toxoplasma, Pneumocystis y Rickettsia
Tinción policromática que contiene una mezcla de azul de
metileno, azur B y eosina Y.
Tiñen componentes básicos de lar células, de color naranja a rora, mientras que tiñen las estructuras ácidas de la célula con diversos tonos de azul a morado.
Tinción tricrómica
Alternativa a la hematoxilina Férrica para teñir protozoos.
Los protozoos tienen citoplasmas de color azulado-verde a
morado con núcleos rojos o morados-rojos y cuerpos de inclusión; el fondo de la muestra es verde.
OBJETIVOS
Detección inicial de microorganismos.
Identificación preliminar o definitiva de los mismos.
Las características morfológicas permite diferenciar
Microorganismos
Hongos
Parasitos
Bacterias
CULTIVO IN VITRO
TIPOS
MEDIOS SELECTIVOS, DIFERENCIALES
Agar xilosa-lisina-desoxicolato
Agar diferencial selectivo para Salmonella y Shigella en cultivos entéricos.
Medio de
Lowenstein-Jensen
Selectivo para micobacterias
Agar sal manitol
Selectivo para los estafilococos.
Diferencial para
Staphylococcus aureus
.
Agar Middlebrook
Selectivo para micobacterias
Agar MacConkey
Selectivo para las bacterias gramnegativas;
Diferencial para las especies que fermentan la lactosa
CHROMagar
Selectivo, diferencial para las
levaduras
Agar inhibidor de hongos
Selectivo para los hongos
filamentosos
MEDIOS ESPECIALIZADOS
Caldo de cultivo Lim
Recuperación de
Streptococcus agalactiae
.
Agar sorbitol de
MacConkey
Recuperación de
Escherichia coli O157
.
Agar cistina-telurito
Recuperación de
Corynebacterium diphtheriae
.
Agar Regan Lowe
Recuperación de
Bordetella pertussis
.
Agar extracto de levadura con carbón vegetal tamponado (BCYE)
Recuperación de Legionella
y Nocardia
Agar sacarosa, sales bIliares, tiosulfato y citrato (TCBS)
Recuperación del género
Vibrio
.
MEDIOS NO SELECTIVOS ENRIQUECIDOS
Agar Mueller-Hinton
Medio para estudio de la
susceptibilidad bacteriana
Caldo tioglicolato
Caldo enriquecido para las
bacterias anaerobias
Agar chocolate
Recuperación de bacterias, incluidas
Haemophilus y Neisseria gonorrhoeae
Agar dextrosa
de Sabouraud
Recuperación de hongos
Agar sangre
Recuperación de bacterias
y hongos
Relativamente pocos laboratorios preparan en la actualidad sus propios medios de cultivo.
La mayor parte son producidos por empresas con experiencia en la fabricación de los mismos.
El éxito de los métodos de cultivo depende de
Lugar de la infección
De la respuesta inmunitaria del paciente frente a la infeccion.
Biología del microorganismo
De la calidad del medio de cultivo.