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MICROSCOPIA ELECTRÓNICA, preparación, a lo largo de la columna, sometidas,…
MICROSCOPIA ELECTRÓNICA
Microscopio electrónico
resuelve estructuras finas
de
tejido
material observado
célula
amplia el poder de resolución
al emplear
haces de electrones
tipos
MET
Microscopio electrónico de transmisión
MEB
Microscopio electrónico de barrido
muestras biológicas
técnicas especiales
corte
tinción
inclusión
Microscopio electrónico de transmisión (MET)
posee
componentes equivalentes al microscopio óptico
fuente de iluminacion
filamento de tungsteno que emite electrones
acelerados por
ánodo
forma
haz de electrones
se debe
trabajar al vacío
extraer el aire
bobinas electromagnéticas
enfocan y concentran
haz de electrones
chocan y cambian de dirección
dependiendo de la densidad de las partículas que componen la muestra
permite observar
ultraestructura celular
poder de resolución
mayor al Microscopio óptico
Preparación de muestras
vacío intenso
no es posible observar muestras vivas y húmedas
tejidos
1° fijarse
preservar la fina estructura celular
estabilizar a la célula para afrontar los pasos subsiguientes
detener los procesos metabólicos
2° embebidos en resinas
resinas de epoxi
mas utilizadas
dependiendo de la resina a utilizar
protocolo especifico
deshidratación
inclusión
3° cortar en ultramicrotomos
factores para la elección de fijadores
selección de los vehículos apropiados para la fijación
selección de los procedimientos para la aplicación de fijadores a células y tejidos
selección del agente fijador apropiado
coloración de rutina
coloración negativa
especímenes embebidos en soluciones de microcristales de metales pesados
determinan
mayor contraste
Fundamento
se utilizan
átomos pesados como colorantes
proporcionan densidad a ciertas estructuras
desvían mucho a los electrones
electrones que atraviesan la muestra
dispersados
estructuras contrastadas con material electrodenso
enfocados
forman imagen sobre
placa fotográfica
pantalla fluorescente
cuanto mayor es el numero atómico de los componentes de la muestra
mayor dispersión de electrones
preparación
a lo largo de la columna
sometidas
deben
por
habrá
Grupo 4: Carmen, Cristian Alberto - Fernandez, Marielis - Moya, Ana