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PRACTICA DE CELULAR - Coggle Diagram

- - - - se usa para analizar partículas pequeñas, que presentan muy escaso contraste con la microscopia de campo claro
      - se emplea un condensador especial llamado condensador parabólico
        
        Impide que llegue la luz directa al objetivo, solo la luz desviada o dispersada por la muestra que se desea observar
      - Imagen
        
        cuando la luz es dirigida hacia los especímenes, se ilumina solo su superficie
        
        el objeto se visualiza luminoso sobre fondo oscuro
      - Principio de funcionamiento
        
        el microscopio de campo oscuro se basa en la dispersión de la luz por parte de partículas con diferentes índice de refracción que se encuentran en el limite del poder de resolución.
      - la luz luego de ser redireccionados por el diafragma de campo oscuro, son dirigidos de forma lateral, iluminando la muestra en forma muy oblicua por lo que solamente penetran en el microscopio la luz dispersada por la muestra.
      - no permite visualizar detalles estructurales , permite resolver partículas mas pequeñas que las observadas con el microscopio de campo claro.
      - no requiere agregado de ningún contraste artificial en los especímenes
    - - Método mas común para examinar células vivas
        
        resalta estructuras intracelulares de las células
        
        posible verlas sin colorantes.
      - Principio de funcionamiento
        
        Cuando un rayo de luz es emitido desde una fuente, se divide en dos y atraviesa (refracta) un medio transparente, los dos rayos se pueden recombinar sin interferencia. Sin embargo uno de los rayos puede atravesar el medio con un índice de refracción diferente y así su velocidad se altera, diferenciándose del otro, cuando se recombinan pueden estar en diferentes fases.
        
        si esto sucede se produce una interferencia y la recombinación de los rayos produce una imagen menos luminosa que la original.
      - La fuente de luz es un cono hueco de luz o anillo de contraste de fases
      - Imagen
        
        Imagen con una gama de grises que refleja las diferentes densidades e índices de refracciones de la muestra
        
        la imagen aparece clara sobre un fondo de color oscuro
      - posibilidad de obtener datos cualitativos
    - - Principio de funcionamiento
        
        se basa en las diferencias producidas por el paso de la luz a través de distintas estructuras del objeto
        
        la luz emitida de una fuente y es dividida, de los cuales uno pasa a través del objeto y el otro alrededor y actúa como haz de referencia. Luego ambos rayos vuelven a unirse interfiriendo entre si. El rayo que atravesó el objeto sufre un retraso respecto al haz de referencia (sufre una modificación de fase).
        
        el valor del retraso puede emplearse para determinar la masa por unidad de superficie del preparado y, en consecuencia, la densidad de masa de los elementos celulares individuales.
      - este microscopio mejora el contraste, elimina los efectos de halo de los bordes
        
        este microscopio mejora el contraste, elimina los efectos de halo de los bordes
      - Posibilidad de obtener datos cuantitativos
      - Microscopio de interferencia de normanski
        
        características especiales
        
        emplea luz polarizada
        
        prismas de interferencia diferencial
        
        portaobjetos especiales
        
        analizadores de imágenes
        
        transforma planos de vibración en imágenes tridimensionales
        
        la luz atraviesa objeto y objetivo y se divide en dos rayos que interfieren entre si, dando imágenes con aspecto de relieve.
  - - - dos lentes convergentes que operan de manera conjunta
        
        lente objetivo
        
        se sitúa próxima al objeto
        
        lente ocular
        
        se sitúa próxima al ojo del observador
    - - el principio de funcionamiento de un microscopio de campo claro es la transiluminación o diascopia. Implicando q la luz atraviese la muestra biológica, cambiando sus características y estas modificaciones se hacen visibles mediante los sistemas de lentes.
    - - son aquellos que con el empleo de luz permiten la formación de imágenes a partir de una muestra.
        
        Fuente de iluminación
        
        Lente condensador
        
        recoge los rayos de luz y los dirige a la muestra
        
        Lente objetivo
        
        Prisma
        
        redirecciona los rayos, para lograr una correcta trayectoria a los lentes
        
        lentes oculares
    - - Función de sostener a los elementos ópticos, y permitir ajustes para la obtención de imágenes
        
        base estructural
        
        sostiene al microscopio y permite su apoyo
        
        diafragma
        
        regula la cantidad de luz que ingresa al sist. optico
        
        brazo
        
        conecta la base al cabezal y desde ahí se sostiene para el traslado
        
        cabezal
        
        contiene el prisma óptico y conecta con los tubos oculares y revolver
        
        platina
        
        base de apoyo y sujeción para el porta objeto
        
        tornillo macrométrico
        
        permite el movimiento de de la platina en sentido vertical
        
        tornillo micrométrico
        
        permite el movimiento vertical mínimo de la platina, ajuste fino
        
        ajuste axial XY o tornillos del charriot
        
        tornillos que permiten el desplazamiento del portaobjeto en el plano XY permitiendo el correcto alineamiento de la muestra a la marcha de rayos
  - - - capacidad de distinguir detalles finos en la imagen
    - - capacidad de un sistema óptico de producir imágenes separadas de objetos muy próximos entre si
    - - es la relación entre el tamaño de la imagen y el tamaño del objeto en valores lineales
    - - capacidad del sistema óptico de agrupar las refracciones de la luz, producidas por los detalles finos del objeto. Expresa el tamaño del haz de luz que es captado por la lente objetiva.
    - - Es una medida de la velocidad de dispersión de una onda luminosa a través de un determinado medio.
    - - Discrepancia entre la imagen observada y la predicha por la teoría
- - - - Articulo original, Articulo de investigación, investigación o articulo
      - utilizado para publicar informes completos de los datos de la investigación
      - incluye: introducción completa, métodos, resultados y discusión.
    - - comunican informes breves de datos de investigación original que los editores creen que serán interesantes para muchos investigadores y que probablemente estimularán más la investigación en su área.
      - tienen limite de longitud, algunos detalles experimentales pueden o no publicarse hasta que los autores escriban un manuscrito completo de la investigación original
    - - proporcionan un resumen amplio de la investigación sobre cierto tema, y una perspectiva sobre el estado y perspectivas futuras del campo científico.
      - son escritos por lideres de una disciplina. Suelen ser ampliamente leídos. citan generalmente alrededor de 100 artículos primarios del campo de investigación
    - - Informan sobre casos específicos de fenómenos interesantes. El objetivo es hacer que otros investigadores conozcan la posibilidad de que un fenómeno especifico pueda ocurrir, se usa en medicina
    - - Estos artículos presentan un nuevo método experimental, prueba o
        procedimiento, puede ser completamente nuevo o puede ofrecer una versión mejorada
        de un método existente. debe describir un avance demostrable
    - - son comunicados que las editoriales publican para los lectores de sus revistas, pueden incluir
        agradecimientos especiales, o adelantos de temas próximos a publicar.
- - - - tiene como finalidad anular el metabolismo celular, impedir la degradación enzimática de las células por autolisis.
      - elimina macroorganismos perjudiciales para la muestra y endurecer el tejido como consecuencia de la desnaturalización de moléculas proteicas
      - la fijación conserva las células estableciendo puentes cruzados entre sus moléculas, de modo que estas puedan estabilizarse y quedar bloqueadas.
      - los fijadores mas utilizados son los aldehídos activos: formaldehido y glutaraldehído que forman puentes cruzados con moléculas adyacentes.
    - - Tiene por finalidad la extracción del agua del tejido para que la parafina ocupe
        su lugar. Si el material no se deshidrata suficientemente, la inclusión es defectuosa.
      - : Sumergir las muestras en una batería creciente de alcohol según las siguientes
        concentraciones y tiempos.
        
        Alcohol 50º 30 minutos
        
        Alcohol 70º 30 minutos
        
        Alcohol 80º 30 minutos
        
        Alcohol 90 º 30 minutos
        
        Alcohol 100 º 30 minutos
        
        Xilol 2 15 minutos
        
        Xilol 1 15 minutos
    - - este paso es necesario para que a la muestra le de consistencia, para así poder ser cortados
      - es una sustancia químicamente inactiva por lo que se conserva indefinidamente en la estufa. Se licuefacta con facilidad, a temperatura ambiente de encuentra en estado solido
        
        las sustancias mas utilizadas son ceras y resinas
      - En estado líquido,
        estos medios penetran y rodean todo el tejido, entonces pueden ser endurecidos por enfriamiento
    - - Obtención de láminas delgadas (de 5 a 15 micras)
      - Las muestras de tejidos son demasiado gruesas para que sus células sean examinadas directamente
        en el microscopio por esta razón deben ser cortados en un MICROTOMO
      - las muestras recién cortadas SON COLOCADAS EN UN PORTAOBJETOS
    - - después de haber realizado el corte, se pasan los cortes con el ayuda de un pincel de pelo fino a una fuente de agua corriente contenida en un recipiente
        
        posterior a esto se pone agua caliente a 45° para que las muestras se extiendan bien. después con la ayuda de un portaobjeto se los retira del baño maría
        
        puede ser con baño maría o plancha a calor.
    - - se realiza este paso con el fin de quitar todo rastro de parafina o cera, porque los colorantes son hidrosolubles y si la muestra contiene la cera q repele el agua, el colorante no se distribuida uniformemente
      - la hidratacion es para mantener la integridad del tejido ya que si esta seco corre el riesgo de q la muestra se rompa
        
        se suiguen los siguientes pasos en orden
        
        Xilol 1 15 minutos a estufa
        
        Xilol 2 15 minutos a estufa
        
        Alcohol 90º 1 minuto a temperatura ambiente
        
        Alcohol 80º 1 minuto a temperatura ambiente
        
        Alcohol 70º 1 minuto a temperatura ambiente
        
        Alcohol 100º 1 minuto a temperatura ambiente
        
        Alcohol 50º 1 minuto a temperatura ambiente
        
        Agua destilada 1 minuto a temperatura ambiente
    - - las muestras histológicas poseen poca coloración carecen de el, por lo que no pueden ser observadas directamente en el microscopio
      - Tipos
        
        Hematoxilina
        
        colorante CATIONICO O BASICO
        
        presenta afinidad a moléculas con carga negativa y por ello revela con colores azules y violáceos las moléculas acidas (basofilas) como el ADN, ARN y proteínas acidas.
        
        Eosina
        
        colorante ANIONICO O ACIDO
        
        Presenta afinidad por moléculas con carga positiva y pone en manifiesto en color rosado a proteínas básicas (acidófilas)
        
        Rojo neutro
        
        tiñen tanto moléculas básicas y acidas
        
        Tricromicas
        
        junto con la técnica hematoxilina y eosina se las conoce como colación morfológica
        
        ya que ponen en evidencia la morfología celular y permite establecer diferencias de tamaño, posición y forma
        
        PAS
        
        Alcian blue
    - - Agua común lavado rápido del excedente de eosina
      - Alcohol 50º pasaje rápido
      - Alcohol 70º pasaje rápido
      - Alcohol 96º pasaje rápido
      - Alcohol 100º 3 minutos
      - Alcohol 100º 3 minutos
      - Xilol 5 minutos a estufa 60°
      - Xilol 5 minutos a estufa 60°
      - como los colorantes son hidrosolubles, se realiza este paso para eliminar excedentes de agua
    - - Tiene por objeto mejorar la observación, facilitar el manejo y aumentar la
        duración de los preparados histológicos.
      - se coloca una gota de bálsamo de Canadá y un cubre objeto, procurando eliminar las posibles burbujas de aire que se pudieran hacer formado
        
        luego de esto se lleva a estufa a 40° para que se endurezca el bálsamo.
  - - - ¿como las observamos
      - ¿Cómo las manipulamos?
      - ¿Cómo las mantenemos sin que se pierda su estructura?