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VARIANTES DE PCR - Coggle Diagram

- - - - Usado para identificar uma enzima de restrição ECOR1 (que reconhece uma porção do gene
        
        A ECOR1 reconhece uma dessas características e cliva
  - - - Microssatélites: repetições pequenas de pares (ATAT) repetidas consecutivamente de 2-4 pb
      - Minissatélites: são repetições de 10-100pb (encontrado geralmente em reg. Telomericas)
      - Indel: detecção de deleções e inserções
  - - - Usa uma enzima (conhecida) para cortar o DNA em vários fragmentos – ocorre a amplificação desses fragmentos
  - - - Técnica usada para avaliar vários indivíduos e comparar depois (ex mutação)
- - - - DNA polimerase com atividade nuclease 5’ e uma sonda. A sonda consiste em curto
      - oligonucleotídeo de fita simples específico contra o fragmento de interesse, com um fluoróforo repórter em sua extremidade 5’ e um quencher em sua extremidade 3’.
      - A sonda se liga ao DNA de interesse quando este está em sua forma desnaturada - quando a sonda
      - está intacta, o quencher impede a emissão de sinal pelo repórter.
      - Durante a amplificação, a atividade de nuclease da DNA polimerase hidrolisa o oligonucleotídeo da
      - sonda ligada ao DNA, de modo que o repórter e o quencher são separados e sinal fluorescente é emitido
- - - - Vetor especifico: quando amplifica aumenta o tamanho
      - Orientação especifica: faz um primer para se ligar ao vetor e outro para o inserto
      - especifico: faz um primer que se liga com ele mesmo que vai gerar um produto de
        amplificação
- - - - Após o anelamento diminui a temperatura para que ocorra a amplificação