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CROMATOGRAFÍA - Coggle Diagram
CROMATOGRAFÍA
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Fases estacionarias
Mecanismo de interacción
Intercambio iónico
Se utiliza una resina con grupos funcionales iónicos como fase estacionaria que atrae que los compuestos con carga opuesta e impide que se eluyan fácilmente (hasta adicionar una sal) y repele compuestos de la misma carga provocando que se eluyan antes.
Interacción hidrofóbica
Fase normal
Se utiliza una fase estacionaria polar (como sílica) y una fase móvil no polar (como cloroformo) y los compuestos hidrofóbicos se eluyen con mayor facilidad (antes) debido a la poca tendencia a formar puentes de hidrógeno o puentes ion dipolo.
Fase reversa
Se utiliza una fase estacionaria no polar (como sílica con alquilaciones) y una fase móvil de agua y los compuestos hidrofílicos se eluyen con mayor facilidad (antes) debido a su baja susceptibilidad a interactuar con moléculas no polares de la fase estacionaria por fuerzas de dispersión de London o fuerzas Van der Waals.
Afinidad
Se inmovilizan ligandos, sustratos, antígenos, proteínas u otras moléculas en un polímero (como agarosa) para que funcione como fase estacionaria y se eluyan facilmente todas las moléculas (enzimas, receptores o anticuerpos, según sea el caso) que no tengan afinidad por la matriz. Las moléculas de interés se obtienen mediante un lavado cambiando el pH o fuerza iónica.
Exclusión de tamaño
Se utiliza una fase estacionaria polimérica porosa por la cual las moléculas pequeñas pasan con dificultad y se quedan atrapadas en los poros mientras que las grandes, debido a impedimentos estéricos, se desplazan únicamente por zonas libres de polímeros. Esto causa que las moléculas grandes se eluyan primero.