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ANÁLISE DE SALMONELLA SPP. EM ALIMENTOS - Coggle Diagram
ANÁLISE DE
SALMONELLA
SPP. EM ALIMENTOS
Procedimento diferenciado
etapas:
pré-enriquecimento
enriquecimento seletivo
plaqueamento seletivo e diferencial
identificação bioquímica e sorológica
Método ISO 6579:2007
atualizado em 2017
Método APHA (2001)
Pré-enriquecimento
25g de amostra + 225 mL de meio enriquecido
promove o crescimento das células injuriadas previamente
se plaquear direto:
MO pode estar viável mas :red_cross: cultivável
com as condições para se desenvolver, "imita" reação do organismo
doença
incubação:
35ºC, por 24h
água peptonada tamponada ou caldo lactosado
Enriquecimento seletivo
caldo Rappaport-Vassiliadis
incubação:
41,5ºC, por 24h
verde malaquita:
bacteriostático!
caldo tetrationato
incubação:
37ºC, por 24h
+ verde brilhante:
:red_cross:
Proteus
1 mL da cultura pré-enriquecida + 0,2 mL iodo
permite o crescimento de
Salmonella
e inibe outros MOs
0,1 mL da cultura pré-enriquecida
Plaqueamento seletivo e diferencial
promoção do crescimento de colônias com características de
Salmonella
a partir do que foi encontrado no caldo RV e tetrationato
pelo método ISO:
Ágar XLD
incubação:
35-36ºC, por 24h
"xilose lisina desoxicolato"
colônias róseas e escuras/pretas =
Salmonella
+
outros:
Ágar BPLS
"verde brilhante vermelho de fenol lactose sacarose"
colônias róseas =
Salmonella
+
:red_cross: fermentam lactose e sacarose
Ágar Hectoen Enteric
Ágar
Salmonella Shigella
Identificação bioquímica e sorológica
sorológica
identificar
Salmonella
identificar sorovar
teste de antígenos
O (somático)
H (flagelar)
Prova de soroaglutinação
cultura proveniente do THI
numa placa:
cultura + gotas de água destilada + gotas de soro
grumos
:check: gênero
Salmonella
ISO/TS 6579 - 3 (2014)
para
S.
Typhimurium
identifica
sorotipo
de
Salmonella
antígeno O:4 +
deve aglutinar com O:5 para ser + ou -
aglutinar com H:i e H:2 para reação + ou -
ambas +: :check:
S.
Typhimurium
para
S.
Enteritidis
para diferenciar de
S
. Gallinarum
antígeno O:9 +
aglutinar com H:G; se +
aglutinar com H:m; se +
aglutinar com H:s, H:q e H:t como controle -
aglutinar com O:46; se -
1 more item...
a partir da escolha de
5 colônias típicas
Ágar BHI
incubação:
35ºC, por 24h
não seletivo
a partir da cultura de BHI:
testes bioquímicos
Triagem BQA
TSI
inocular picada com agulha de platina até o fundo + estriamento na rampa
rampa
coloração rósea (degradação do substrato proteico após glicose ser consumida em aerobiose) = pH alcalino
fundo ou meio:
coloração negra (redução do tiossulfato)
fundo:
amarelo (consumo de glicose em anaerobiose) = pH ácido muda o indicador de vermelho para amarelo
incubação:
35-37ºC, por 24h
LIA
inoculação igual ao TSI
:red_cross:
mudança no meio
(púrpura)
Salmonella
faz a
descarboxillação da lisina
cadaverina
neutraliza o ácido
formado pela fermentação da glicose
pode haver produção de
H2S
Ureia
inocular superfície com alça de platina
meio:
mantém a cor (amarelo)
Salmonell
a :red_cross:
hidrolisa a ureia
:red_cross:
urease
Testes BQA
Indol
Salmonella
:red_cross: produz indol
enzima
triptofanase
VM
Salmonella
:check: fermenta glicose
avalia a
produção de ácido
pela
fermentação de Gli
Citrato
Salmonella
:check: citrato como fonte de carbono
modifica o
meio
: verde para
azul
Motilidade
Salmonella
:check: motilidade
inocular picada no meio SIM/ágar motilidade
crescimento com turvação
Malonato
Salmonella
:red_cross: malonato
:red_cross: malonato como
única fonte de carbono
meio mantém a cor
verde
Dulcitol
Salmonella
:check: dulcitol
fermenta dulcitol
meio muda de
vermelho para amarelo
VP
Salmonella
:red_cross: Voges Proskauer
produção de
acetoína
:red_cross: