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Tinción, siembra y cultivo bacteriano. - Coggle Diagram
Tinción, siembra y cultivo bacteriano.
Tinción
Es el proceso por el cual las moléculas de un colorante se adsorben a una superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico
tincion de Gram
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pasos
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Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de genciana (lugol).
El lugol y el violeta de genciana forman un complejo insoluble en agua capaz de penetrar en la pared de las células bacterianas.
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Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o fucsina para distinguir
las gram negativas que aparecerán bajo el microscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o rojo. Lavar con agua.
Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se visualizarán
de color violeta las gram positivas y de color rosa-rojizo las gram negativas.
Siembra
Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inóculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y multiplicación. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada para el crecimiento.
tipos
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por estría
La siembra por estría permite aislar las bacterias que dan lugar a colonias separadas y posteriormente, transfiriendo una sola colonia a un medio nuevo, se permite el desarrollo de un cultivo puro bacteriano.
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por picadura
Se siembra por picadura o punción utilizando un hilo. Este tipo de medio contiene una proporción menor de agar que los medios sólidos. El medio queda inoculado al introducir el hilo en profundidad, pero sin tocar el fondo del tubo, retirándolo posteriormente por la misma trayectoria utilizada al realizar la picadura.
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Cultivo bacteriano
El cultivo es el proceso de proliferación de microorganismos al proporcionarles un entorno con condiciones apropiadas. Los microorganismos en proliferación producen réplicas de sí mismos y necesitan los elementos presentes en su composición química.
medios de cultivo
Agar nutritivo
Agar Nutritivo Estándar es un medio adecuado para el cultivo y enumeración de bacterias exigentes. La adición de sangre, fluido de ascitis o suero lo hace también adecuado para cultivar estreptococos, neumococos y otros microorganismo
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Agar MacConkey
El crecimiento en el medio MacConkey II Agar indica la presencia de bacilos gram negativos, por ejemplo, Enterobacteriaceae (como E. coli y muchos otros de estos bacilos). CLED Agar y MacConkey II Agar sólo permiten una presunta diferenciación de las colonias conforme a la prueba de fermentación de la lactosa.
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