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Contagem de Enterobacteriacea - Coggle Diagram
Contagem de Enterobacteriacea
Preparo da diluição da amostra
Desinfecção das amostras com álcool
Pesagem de 25g de amostra em bequer com saqueta
Diluição da amostra com 225 mL de água Peptonada
Homogeneização em homogeneizador de saquetas por dois minutos
Identificação dos tubos com 9 mL de água peptonada com suas respectivas diluições
Pegar 1 mL de amostra já homogeneizada na saqueta
Colocar o 1 mL no tubo com água peptonada de maior diluição (10^-2).
Homogeneizar o tubo
Pegar 1 mL da amostra diluída (10^-2)
Transferir para o próximo tubo de diluição (10^-3)
Homogeneizar o tubo
Inoculação em profundidade
Fazer duas placas para cada diluição anterior
Utilizar 3 diluições
(10^-1) (10^-2) (10^-3)
Começar da menor para a maior diluição
Pegar 1 mL da amostra diluída anteriormente para sua respectiva placa
Colocar 1 ml da diluição nas duas respectivas placas
Repetir o processo em cada uma das diluições
Adicionar cerca de 10 mL de Ágar cristal violeta vermelho neutro bile glicose (VRBG) nas placas
Repetir processo em cada uma das diluições
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RESULTADO CONTAGEM DE COLÔNIAS
Selecionar 5 colônias típicas
Inocular em ágar nutriente por 24 horas a 37ºC
Teste da oxidade
Aplicar uma alçada da cultura em ágar nutriente em um disco de oxidase
Positivo
: coloração Violeta ou azul
Teste fermentação de glicose
Inoculação com agulha de platina em dois tubos
Adição óleo mineral estéril em um tubo
Incubação por 24 horas a 37ºC
Positivo
: Viragem do pH para ácido
4 colônias das 5 foram positivas para Enterobacteriacea
Diluição 10^-2
126,5 x 10^2 x 0,8
1,0x10^4 UFC/g
80%
132 e 121 colônias
Média: 126,5