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INMUNOENSAYOS
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INMUNOENSAYOS
Los Inmunoensayos son métodos que evalúan la concentración de un analito basados fundamentalmente en la alta afinidad y especificidad de la reacción de reconocimiento entre el anticuerpo y un determinante antigénico de dicho analito.
Ensayos Competitivos
Se miden los sitios del anticuerpo sin ocupar, es decir sitios libres del analito; y por lo tanto los sitios ocupados por la hormona son calculados implícitamente
Ensayos No Competitivos o Inmunométricos
Se miden directamente los sitios del anticuerpo que están ocupados por la hormona, y se utilizan concentraciones relativamente grandes del anticuerpo
Técnicas de separación
Ensayos heterogéneos competitivos
Involucran la unión del antígeno al anticuerpo seguida de una separación física de la hormona unida al anticuerpo (AgAc) y la hormona no unida (Ag)
Ensayos heterogéneos no competitivos
Los ensayos inmunométricos heterogéneos involucran la separación de las fracciones libre y unida. El método de detección de la señal dependerá del tipo de sustancia marcadora utilizada.
Ensayos competitivos homogéneos
Los ensayos competitivos homogéneos también involucran la unión del antígeno al anticuerpo pero no requieren separación del complejo (Ag-Ac) y el (Ag) libre.
Ensayos biológicos o bioensayos
Son sistemas en los cuales se evalúa la actividad biológica de una hormona a través de una respuesta fisiológica, la cual puede ser cuantificada. La respuesta medida resulta de una modificación funcional en una célula o agregado de células metabólicamente activas.
Bioensayos “in vivo”
Se evalúan las respuestas fisiológicas complejas que se completan en días o semanas y dependen de la distribución, metabolismo, vida media e interacción con otras hormonas.
Bioensayos “in vitro”
Utilizan tejidos endócrinos, cultivos primarios, líneas celulares establecidas, membranas u organelas. Estos bioensayos pueden agruparse según la naturaleza de la respuesta que evalúan.
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