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TECNICAS DE EXTRACCION DE ADN - Coggle Diagram
TECNICAS DE EXTRACCION DE ADN
Lisis De La Célula
tecnica fenol cloroformo
emplea detergentes
eliminando proteinas
extraccion de componentes lipidicos
Triton dodecil sulfato sódico SDS
rompen membranas celular y nuclear
Separación
se lleva a cabo en un buffer de lisis
la incubación con la enzima se realiza por 2h a 65ªC
homogenizacion de ADN
homogeneizador manual
Purificación
se combina la extraccion, cromatografia, centrifugacion, electroforesis y la separacion por afinidad
fenol-cloroformo
solucion que tiene 25:24:1 v/v
se añade hidroxiquinolina al 0.1%
antioxidante del fenol
inhibador parcial de ARNsas
Precipitación
añade alcohol
isopropanol
0.7 veces el volumen de la fase acuosa
etanol
cantidad para precipitar dos veces el volumen de la fase acuosa
realizada a temperatura hambiente
Disolución
cantidad mínima
aseguran su preservacion
agua estéril
soluciones amortiguadoras
Lavado
etanol al 70%
mantiene al ADN precipitado
2 ocaciones
H2O al 30%
permite la disolución de las sales presentes