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extracción de ácidos nucleicos - Coggle Diagram
extracción de ácidos nucleicos
se debe considerar que la molécula de ADN por su estructura helicoidal, es mas frágil por ser larga, por lo que se somete a fuerzas hidrodinamicas que la disgregan
elección del método de extracción
organismo de origen del ácido nucleico
fuente del ácido nucleico
tipo de ácido nucleico
las fuentes posibles son: lisis de la célula, separación, purificación, precipitación, lavado y disolución
técnica con la que se extraerá el ácido nucleico
extracción de ADN por técnica fenolcloroformo: se fundamenta en la lisis total de las células y sus estructuras subcelulares mediante el empleo de detergentes con la posterior eliminación de las proteínas mediante su extracción y la de los componentes lipídicos
Extracción de proteínas y libidos con solventes orgánicos
estrategias de la purificacion
precipitacion, cromatografia, centrifugacion, electroforesis y separacion por afinidad
se utiliza una solución que tiene una relación 25:24:1 v/v para el fenol, cloroformo y alcohol isoamilico
cuando se termina la lisis celular, se retiran los restos celulares, esto es la purificación
precipitación de ADN: el ADN se precipita añadiendo alcohol absoluto.
cuando se emplea etanol la cantidad que se requiere es dos veces el volumen de la fase acuosa. y por otro lado al emplear IprOh puede acelerar el proceso
lavado del ADN: se hace después de la evaporación del alcohol, el ADN se disuelve en soluciones que se aseguran de su preservación,
cuantificación de los ácidos nucleicos: los métodos que mas se usan es la espectrofotometria y la fluorometria
espectrofotometría: es que cualquier solución que contenga moléculas suspendidas permite el paso de un haz de luz a través de ella en proporción inversa a la cantidad de moléculas que contiene.
